[发明专利]一种双重适配体修饰的靶向给药系统及其制备方法

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及药物递送系统，具体涉及一种双重适配体修饰的靶向给药系统及其制备方法。本发明针对现有抗肿瘤药物靶向给药系统存在的不足，提供一种新的靶向给药系统，该新型给药系统不仅具有靶向性，该给药系统能同时把化疗药物和基因治疗药物带到特定部位产生协同抗癌作用。本发明的靶向给药系统由聚乙二醇、肽适配体DUP‑1、RNA适配体A10‑3.2、含PTEN的重组腺病毒Ad5和抗肿瘤药物组成，该靶向给药系统的成功构建，可为恶性肿瘤的有效治疗提供一个高效、有力的药物转运平台，这对发展肿瘤分子靶向治疗具有重要的作用和实际价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及药物递送系统，具体涉及一种双重适配体修饰的靶向给药系统及其制备方法。

背景技术

近年来，临床上对于肿瘤治疗的传统方法包括手术治疗、放射治疗、化学治疗等常规手段。其中，化疗作为一种经典且重要的治疗手段，虽然不断有新的化疗药物和化疗方案推出，然而多药耐药问题不仅限制了化疗疗效，同时也是导致肿瘤复发转移的重要原因，是目前临床丞待解决的问题。随着分子生物学手段的发展和完善，以及癌基因和抑癌基因的相继发现，肿瘤的基因治疗发展非常迅猛，在肿瘤治疗中体现出不可估量的作用。

人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensinhomologue deleted on chromosome ten gene,PTEN)是一种新的抑癌基因。现已证实，PTEN基因的突变、失活与多种肿瘤的发生发展密切相关，成为继p16、p21和p53后又一具有重要意义的抑癌基因。目前很多研究表明，将基因治疗与化疗联合使用优于单一的治疗方式。当前列腺的一种被称为CARNs的管腔细胞的PTEN基因失活后，可导致前列腺癌的发生。

适配体是一小段经体外筛选得到的能与相应的配体进行高亲和力和强特异性结合的序列，具有很好的靶向性。前列腺癌细胞根据其特异性膜抗原(PSMA)的表达，可分为PSMA阳性细胞和PSMA阴性细胞。有文献报道，RNA适配体A10是PSMA阳性细胞的特异性适配体，其最新优化序列A10-3.2比A10具有更强的靶向效率；肽适配体DUP-1是PSMA阴性细胞的特异性配体，而且DUP-1还具有肿瘤组织穿透性。基于PSMA阳性和PSMA阴性细胞是形成前列腺癌的两大代表性细胞，本发明将采用A10-3.2适配体靶向于PSMA阳性细胞，DUP-1适配体靶向于PSMA阴性细胞，把化疗药物和基因治疗药物带到特定的前列腺癌细胞发挥抗癌作用。由于在以往的化疗和基因治疗中，由于缺乏靶向性，各种药物在杀死癌细胞的同时，对正常组织和正常细胞也造成了致命的打击，出现了很多副作用，因此靶向治疗越来越受到人们的重视，成为研究的热点。

发明内容

本发明的目的是针对现有抗肿瘤药物靶向系统存在不足，提供一种新的靶向给药系统，该新型给药系统不仅具有靶向性，该给药系统能同时把化疗药物和基因治疗药物带到特定部位产生协同抗癌作用。

我们通过研究发现转染了PTEN基因的耐药前列腺癌细胞对阿霉素的敏感性增强，而且能一定程度逆转耐药细胞株的耐药性；同时阿霉素反过来也会增强PTEN的抑癌活性。根据PTEN基因与阿霉素在抑瘤方面显示的这种协同效应。本发明用功能性PEG为连接臂，利用酰胺反应原理，将适配体DUP-1和A10-3.2同时连接到携载抑癌基因PTEN的腺病毒表面，再利用DOX能与RNA双链CG序列牢固结合的特点，构建一种新型的靶向给药系统。

本发明的靶向给药系统由聚乙二醇、肽适配体DUP-1、RNA适配体A10-3.2、含PTEN的重组腺病毒Ad5和抗肿瘤药物组成。

本发明的靶向给药系统采用聚乙二醇为连接臂，将RNA适配体A10-3.2和肽适配体DUP-1，通过化学步骤连接到含有抑癌基因PTEN的重组腺病毒Ad5表面，然后将阿霉素以嵌入作用方式与RNA双链适配体A10-3.2结合得到。