[发明专利]动态法制备细菌纤维素颗粒的方法及其产品在审
申请号: | 201610222184.5 | 申请日: | 2016-04-11 |
公开(公告)号: | CN105647991A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 吴力克;张娟 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12R1/02 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 王贵君 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 动态 法制 细菌 纤维素 颗粒 方法 及其 产品 | ||
技术领域
本发明属于发酵领域,具体涉及动态法制备细菌纤维素颗粒的方法,还涉及由该方法制 得细菌纤维素颗粒。
背景技术
细菌纤维素(bacterialcellulose,BC)是除植物纤维素之外的另一类纤维素,为细菌合成 的天然惰性材料。细菌纤维素具有优异的生物亲和性、生物相容性、生物适应性和良好的生 物可降解性,是医药、建筑、通讯等行业的原材料,也是世界上公认的性能优异的新型生物 学材料。目前对BC应用主要集中在高附加值的生物医用材料上,如组织工程支架、人造血 管、人造皮肤、敷料等方面。能够产生以细菌纤维素的细菌主要有Acetobacter、Rhizobium、 Agrobacterium和Sarcina等,其中产量最高的为木醋杆菌(Acetobacterxylinus),属革兰氏 阴性(少数可变),严格好氧。公开号为CN102337311A的中国专利公开了以木醋杆菌为菌 株利用土豆废渣为培养基培养细菌纤维素的方法,该方法主要是采用静态培养,培养后形成 细菌纤维素膜。但是利用该方法制得的细菌纤维素不能形成颗粒状或粉末状,无法与其他组 分组合后,加工成更高性能的含细菌纤维素的材料。
因此,亟需一种制备细菌纤维素颗粒的方法,生产成本低,产量高,应用范围更广。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的之一在于提供动态法制备细菌纤维素颗粒的方法,本发明的目 的之二在于提供由所述方法制得的细菌纤维素颗粒。
为实现上述发明目的,本发明提供如下技术方案:
1、动态法制备细菌纤维素颗粒的方法,包括如下步骤:将复苏的木醋杆菌菌液加入特制 培养液中,在26~30℃、转速为80~180rpm、通气量为0.3~0.6v/v·min条件下动态发酵3~5 d,得颗粒状细菌纤维素;
所述特制培养液为土豆废渣加水后在800~100℃条件下加温不低于1小时。
优选的,所述复苏的木醋杆菌由以下方法制得,将木醋杆菌转接至特制培养液中,在 26~31℃、80~180rpm条件下复苏培养至细菌数为106cuf/mL。
优选的,所述动态发酵后还包括如下步骤:培养所获细菌纤维素用0.5mol/L的NaOH 溶液煮15min,再放入质量分数为1%的NaOH溶液中静置2天,用去离子水中浸泡至中 性,干燥,得细菌纤维素颗粒。
本发明中,将NaOH处理后的细菌纤维素颗粒浓缩至含水量为50~70%,然后在-80~-20℃ 下冻结,再用超微粉碎设备粉碎至粒径为800~1200目的颗粒,真空干燥即可。经过此步骤处 理,能够将细菌纤维素中的纤维完全破碎,并且粒度均匀,然后可以直接用于加工产品,如 用3D打印机打印出人工骨支架。
优选的,所述复苏的木醋杆菌的接种量为2~20%。
优选的,所述复苏的木醋杆菌的接种量为12~20%。
2、由所述方法制得的细菌纤维素颗粒。
本发明的有益效果在于:本发明公开了动态法制备细菌纤维素颗粒的方法,该方法简单 易行,能够形成细菌纤维素颗粒,且产量高,本发明为了能使细菌纤维素颗粒中的纤维完全 破碎,粒度均匀,将细菌纤维素颗粒冻结后用超微粉碎设备粉碎,制得的细菌纤维素颗粒能 够直接加工成产品,如通过3D打印加工为人工骨支架。
具体实施方式
下面将结合本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法, 通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
本发明中细菌纤维素颗粒制备使用的生产菌株为木醋杆菌(Acetobacterxylinus),使用的 特制培养液为土豆废渣培养液,其制备方法是将土豆废渣加水在800~100℃条件下加温1小 时即可,并控制土豆渣与蒸馏水的质量比为1:4,土豆废渣为土豆鲜品提取淀粉后的剩余物, 土豆废渣可以按如下方法制备:将土豆清洗后,用粉碎机粉碎成糊浆至用手捻无颗粒感。适 量的注入清水,加速土豆粕的流动,使淀粉和土豆粕更好的分离。将土豆粕用振动次数为130 次/分,筛孔从前至后为30目、50目、60目、80目渐小的平筛过筛,淀粉流入筛下,土豆废 渣从筛上流出,其湿度为75%。也可以采用其他方法分离土豆中的淀粉,进而获得土豆废渣。
实施例1
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