[发明专利]一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法

权利要求书

1.一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，剪切继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，插入抗坏血酸无菌溶液中浸泡进行预处理，再将预处理后的单芽垂直插入生根培养基中，并在特定的光温环境中进行生根培养，最后搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木；具体操作步骤如下：

（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35-40d的黄樟油素型樟树继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度≥2cm的单芽，于节下1-2mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；

（2）预处理：将步骤（1）得到的单芽插入抗坏血酸（VC）50mg/L无菌溶液中浸泡1.5-2h；

（3）生根培养：将经过步骤（2）预处理的单芽垂直插入生根培养基中；在特定的光温环境中进行生根培养；所述的特定光温条件先为20-22℃，光照强度2000-3000lux，光照15-16h/d,培养5-7d；然后在28-30℃，光照强度4000-6000lux，光照12-14h/d，培养10-12d形成根点；继续培养18-20d，86%以上的单芽长出根系，3-5条/株；

（4）炼苗：经步骤（3）生根培养后的单芽长出根系后，搬至自然环境条件下的育苗棚中炼苗，得到黄樟油素型樟树苗木；

所述的生根培养基的配方为：改良ER + NAA 2-3mg/L + ABT₁ 0.5-1mg/L + 抗坏血酸（ VC）30mg/L + 蔗糖 15g/L + 琼脂粉 5.8g/L；

所述的改良ER培养基的配方为：NH₄NO₃ 1200mg/L + KNO₃ 1900mg/L + CaCl₂·2H₂O 440mg/L + MgSO₄·7H₂O 370mg/L + KH₂PO₄ 340mg/L + H₃BO₃ 0.63mg/L + MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L + ZnSO₄·4H₂O 8.64H₂Omg/L + Na₂MoO₄·H₂O 0.025mg/L + CuSO₄·5H₂O 0.0025mg/L + CoCl₂·6H₂O 0.0025mg/L + FeSO₄ 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

2.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：将配制好的生根培养基用1N盐酸和氢氧化钠调至pH值为6.0-6.5，分装至250ml的广口玻璃瓶内，每瓶分装30ml的生根培养基，使用前，在1.1帕压/121℃下高压灭菌20min。

3.根据权利要求1所述的一种黄樟油素型樟树组培芽的生根方法，其特征在于：步骤（2）中单芽插入抗坏血酸（VC）无菌溶液的深度为芽茎下端基部0.4-0.5cm处。