[发明专利]一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法，本发明属于医疗产品领域。

背景技术

阿尔茨海默综合症（AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。AD是老年期最常见疾病之一，世界卫生组织（WHO）估计全球65岁以上老年人群AD的患病率为4%~7%。AD患病率与年龄密切相关，年龄平均每增加6.1岁，患病率升高1倍；在85岁以上老年人群中，AD患病率可高达20%~30%。2001年全球AD患者超过2000万，估计到2040年，全球AD患者将超过8000万。自1999年，中国开始进入老龄化社会，与之相对应的，目前中国老年人群AD患病人口已经超过600万，预计到2050年患病人口将超过2000万，是世界上AD患病人口最多、增长速度最快的国家。AD是造成老年人失去日常生活能力的最常见疾病，也是导致老年人死亡的第5位病因。AD不仅给患者带来巨大的痛苦，还给家庭和社会带来了沉重的精神压力和医疗、照料负担。因此，AD已成为影响全球公共健康和社会可持续发展的重大问题。尽管世界各国对AD治疗药物的研发投入了大量人力物力，仍未能研发出延缓或阻止AD进展的药物。因此早期诊断治疗是防治AD的关键时期。

目前阿尔兹海默综合症临床常用的诊断方法有：1、神经影像学检查、脑电图：如计算海马区神经原纤维缠结和老年斑数，与临床诊断的符合率可达81%～88%。由于正常老年人也有一定数量的神经原纤维缠结和老年斑，且有同样的分布，准确率较低，非常耗时而且很昂贵；2、神经心理学测验：神经心理学测验是在现代心理测验基础上发展起来的用于脑功能评估的一类心理测验方法。因个体差异较大，准确率较差。对于早期患者，检出率并不理想；3、基因检测：通过检测阿尔兹海默综合标志性因子，如淀粉样蛋白前体蛋白基因（APP）、早老素1、2基因（PS1、PS2）等，有简便、敏感、特异等优点，但需要相应的检测设备，技术要求高，费用高，难以推广。4、血液学检查、脑脊液检测：主要用于检测阿尔兹海默综合症特异性蛋白，发现存在的伴随疾病或并发症、发现潜在的危险因素。目前常用ELISA免疫诊断技术检测血清中或脑脊液特异性蛋白，具有常规程序冗长费时、不易于推广、灵敏度低等。因此寻找一种快速、方便携带、操作简单、灵敏度高，对阿尔兹海默综合症的诊断和方法学建立具有十分重要的意义。

分裂原激活的蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinases，MAPK)家族是非常保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是信号转导过程中一组主要的信号分子，在发育和疾病发生过程中起重要作用。MAPK家族有4个成员，即细胞外信号调节激酶(extracellularregulatedproteinhnasel/2，ERK1/2)、c-junN端激酶(c-junN-terminalkinase，JNK)、应急激活的蛋白激酶(stressactivatedproteinkinase，SAPK)、P38MAPK/ERK5/BMK1(bigmitogen-activatedproteinkinase，BMKl)。

P38蛋白激酶是由Han等用内毒素刺激哺乳动物(mammal;mammalian)细胞，从中分离纯化的酪氨酸磷酸蛋白激酶。P38是MAPK家族控制炎症反应最重要的成员，它可因生理性应激、脂多糖、渗透性应激和紫外线照射而激活。脂多糖、肿瘤坏死因子(TNF)、血小板激活因子、白细胞介素―1和缺血/再灌注等炎症刺激，能诱导内源性免疫细胞如单核细胞、内皮细胞和中性粒细胞内的P38激活。P38通路的关键酶包括MAPKK类的MKK3、MKK6和MAPKKK类的TAK、ASK、MLK。TAK被TAK结合蛋白(TAB)激活，介导转化生长因子(TGF―β)的信号转导。TAK亦可以激活MKK4，进而活化P38。P38激活后发生核转位，并对许多蛋白激酶和转录因子具有磷酸化和激活的作用。

伦敦大学的科学家通过研究发现，MAPKAPK5的血液蛋白的水平在参与者机体中的水平较低，而这些个体均为在10年的研究期间表现出了认知能力的下降。MAPKAPK5血液蛋白的水平可以揭示个体患阿尔兹海默氏症的风险，可阐明个体轻度认知损伤的发展情况，对于开发有效的干预措施也至关重要。