[发明专利]包含苹果根系发育相关基因MdMIEL1的遗传构建体及其应用有效
申请号: | 201610224299.8 | 申请日: | 2016-04-12 |
公开(公告)号: | CN105734078B | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 郝玉金;安建平;王小非;由春香 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 王澎 |
地址: | 271018 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包含 苹果 根系 发育 相关 基因 mdmiel1 遗传 构建 及其 应用 | ||
1.一种遗传构建体,其特征在于,包含处于强启动子控制下的编码嘎啦苹果的E3泛素连接酶基因片段,所述基因片段具有SEQ ID NO:1所示的DNA序列,所述E3泛素连接酶可使拟南芥株系的侧根增多。
2.根据权利要求1所述的遗传构建体,其特征在于,所述强启动子是能在拟南芥中组成型表达的强启动子。
3.根据权利要求2所述的遗传构建体,其特征在于,所述强启动子是CaMV35S启动子。
4.根据权利要求1所述的遗传构建体,其特征在于,还包含一个或多个产生抗抗生素的抗性基因。
5.根据权利要求4所述的遗传构建体,其特征在于,所述一个或多个抗性基因包括抗潮霉素基因。
6.根据权利要求1所述的遗传构建体,其特征在于,所述构建体为包含所述编码嘎啦苹果的E3泛素连接酶的DNA序列的pCAMBIA 1300质粒,其中所述编码嘎啦苹果的E3泛素连接酶的DNA序列处于所述pCAMBIA 1300质粒上的CaMV35S启动子的控制下。
7.权利要求1-6中任一项所述的遗传构建体用于产生转基因拟南芥的用途。
8.一种用于产生侧根增多的拟南芥株系的方法,其特征在于,将权利要求1-6中任一项所述的遗传构建体导入到拟南芥中,得到转基因拟南芥种子,然后通过对所述转基因拟南芥种子的子代进行多轮筛选来得到纯合拟南芥株系。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)用所述的遗传构建体转化农杆菌感受态细胞,并筛选得到单克隆转化子;
2)培养步骤1)中得到的单克隆转化子,收集菌体,并制成侵染液;
3)用步骤2)中得到的侵染液侵染拟南芥花序;
4)收集所述花序产生的转基因拟南芥种子,通过对所述转基因拟南芥种子的子代进行多代的抗生素和PCR筛选,以得到纯合的转基因拟南芥株系。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述抗生素是潮霉素。
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