[发明专利]绿豆抗豆象基因VrPGIP、其功能性分子标记及应用有效
| 申请号： | 201610224823.1 | 申请日： | 2016-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN105861516B | 公开（公告）日： | 2019-07-12 |
| 发明（设计）人： | 陈红霖;程须珍;王丽侠;王素华 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;A01H5/00;C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绿豆 基因 功能性分子标记 生物信息学分析 染色体步移 分子育种 候选基因 基因资源 经济损失 克隆测序 物理距离 有效控制 育种手段 重要意义 染色体 虫害 应用 育种 成功 开发 | ||
1.绿豆抗豆象基因VrPGIP，其特征在于，基因VrPGIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.含有权利要求1所述基因VrPGIP的载体或工程菌。
3.权利要求1所述基因VrPGIP在绿豆资源抗豆象分子育种中的应用。
4.绿豆抗豆象基因VrPGIP的功能性分子标记，其特征在于，所述功能性分子标记包括6个SNP位点，其中有3个SNP位点引起氨基酸变化，分别位于绿豆抗豆象基因VrPGIP序列的第958、995和1003位碱基，上述三个位点的碱基分别为G、T和A的绿豆为感豆象品种，上述三个位点的碱基分别为T、C和C的绿豆为抗豆象品种；
所述功能性分子标记的序列如SEQ ID NO:6所示。
5.用于检测权利要求4所述功能性分子标记的引物，其特征在于，包括正向引物F5’-ACAGGGTGGGGAATTGCATA-3’和反向引物R5'-GAGGGCGGAAGTAGAGAGAC-3'。
6.含有权利要求5所述引物的用于鉴定绿豆抗豆象品种的PCR检测试剂盒。
7.权利要求4所述功能性分子标记在鉴定绿豆抗豆象品种中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取待测绿豆的DNA；
2)以DNA作为模板，利用扩增所述功能性分子标记的引物，通过PCR反应扩增出绿豆抗豆象基因VrPGIP大小为169bp的DNA片段；
3)检测PCR扩增产物，如果扩增产物序列中第35、72和80位碱基分别为T、C和C，则待测绿豆为抗豆象品种；
其中，步骤2)中使用的引物，其序列同权利要求5所述。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，
PCR反应体系：40ng DNA，1×Taq酶缓冲液，1mmol L-1dNTPs，正、反向引物各0.25μmolL-1和1U Taq DNA聚合酶，ddH2O补至10μl；其中，1×Taq酶缓冲液的组成如下：10mmol L-1Tris-HCl，pH8.8；10mmol L-1KCl；10mmol L-1(NH4)2SO4；1.5mmol L-1MgCl2；0.1％Triton X-100；
反应程序：95℃预变性5min；95℃变性30s，55℃退火45s，72℃延伸45s，32～35个循环；最后72℃延伸5min。
10.权利要求4所述功能性分子标记在绿豆分子标记辅助育种中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院作物科学研究所，未经中国农业科学院作物科学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201610224823.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
