[发明专利]一种黄樟离体植株再生的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种黄樟离体植株再生的方法。

背景技术

黄樟(Cinnamomum porrectum(Roxb.)Kosterm.)隶属樟科(Lauraceae)樟属(Cinnamomum)，成年树高可达20m，胸径40cm以上。黄樟产自我国广州、广西、福建、江西、湖南、贵州、四川、云南等地。巴基斯坦、印度经马来西亚至印度尼西亚也有黄樟分布。

黄樟为常绿乔木，其树姿秀丽，主干明显而通直光滑，生长快速，其胸径年平均生长量比香樟大50％，材积大100％，是优良的速生树种。黄樟木材纹理通直，结构均匀细致，稍重而韧，易于加工，纵切面平滑，干燥后少开裂，且不变性，含油或粘液很丰富，各切面均极油润，耐腐防蛀，且富有香气，是一种贵重木材，也是造船、家具和工艺美术品的绝佳用材。黄樟枝繁叶茂，四季常青，耐修剪，可造型；叶片较大，叶色浓绿，有光泽，秋末时分有部分老叶呈桔红色，较为美观，是优良的园林造景树种，亦可作行道树。黄樟树冠高大，能遮阳蔽日，可滞尘吸音，净化空气，具有优良的生态价值。黄樟的枝叶富含樟脑、樟油，是提制樟脑和蒸取樟油原材料。樟脑有兴奋、强心、消炎、镇痛、抗菌、止咳、促渗等药理作用，多用于医药上，樟油被广泛应用于香料工业、医药卫生等领域，随着现代化工、医药工业的发展进步，人们对天然樟脑、樟油的需求越来越大。

黄樟具有良好的材用、观赏、生态和经济价值，近年栽培和造林面积不断扩大。但目前黄樟人工栽培所用苗木都是采用种子苗造林，来自不同种源、家系种子的遗传变异，导致黄樟苗木及其造林后的林分的生长速度、木材质量、精油含量等相差很大，从而影响到林地经营的产量及经济效益。选择优良母本进行组培规模化育苗，实现良种无性化推广是黄樟这一优良树种产业化开发的重要途径。

目前，黄樟的组织培养技术未见报道。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种黄樟离体植株再生的方法，该方法具有不定芽诱导快、增殖倍率高、芽粗壮伸长快、生根率高、生根苗根系发达健壮、移栽成活率高等特点。

本发明的另一目的在于提供上述方法的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种黄樟离体植株再生的方法，包含如下步骤：

(1)外植体采集：取黄樟树干基部萌枝，作为外植体，然后消毒；

(2)腋芽诱导：将步骤(1)消毒后的外植体接种到诱导培养基进行诱导培养，得到腋芽；

(3)增殖培养：将步骤(2)培养得到的腋芽转接到增殖培养基上进行增殖培养，得到增殖苗；

(4)生根培养：从步骤(3)培养得到的增殖苗中切取顶芽转接到生根培养基上进行生根培养，得到组培生根苗；

(5)炼苗与移栽：将步骤(4)培养得到的组培生根苗移到温室炼苗移栽，得到容器苗；

(6)移栽幼苗管理；

步骤(1)中所述的黄樟优选为：干型通直圆满、树姿秀丽、生长速度快、富含樟脑和樟油、无病虫害的优良黄樟单株为母本；

步骤(1)中所述的黄樟优选为种植时间不小于15年的黄樟；

步骤(1)中优选对黄樟进行基部环割以促进基部萌枝；

步骤(1)中外植体采集前，优选每隔7～10d用多菌灵、百菌清交替喷洒萌枝4～5次；

步骤(1)中所述的外植体采集的时间优选为秋季(9～11月)；

步骤(1)中所述的外植体优选为：半木质化萌枝去叶后切成带1～2个叶腋的茎段；

所述的茎段的长度优选为2～4cm；

步骤(1)中所述的消毒的方式优选为：将外植体清洗后，依次用新洁尔灭溶液、乙醇溶液和升汞溶液浸泡消毒并再次清洗；

步骤(1)中所述的消毒的方式进一步优选为：

①将外植体用水清洗后，用体积分数为0.1％的新洁尔灭溶液刷洗3～7min，再用无菌水冲洗1～2次；

②将步骤①中冲洗后的外植体用体积分数为70～75％的乙醇溶液浸泡20～30s，再用无菌水冲洗1～2次；

③将步骤②中冲洗后的外植体加入质量分数为0.05％～0.1％的升汞溶液中浸泡3～10min，其间不断摇动，再用无菌水冲洗5～6次；具体浸泡时间，依据外植体幼嫩程度确定；

步骤(2)中所述的消毒后的外植体优选切除叶柄、茎段两端受伤部位后，再接种到诱导培养基中；