[发明专利]一种减少小球藻贴壁的培养方法

说明书

技术领域

本发明提供一种利用乳化剂减少小球藻贴壁的培养方法。具体地，在小球藻培养过程中，通过向小球藻培养液中加入适量的乳化剂能够有效地减少小球藻贴壁现象，并且对小球藻的生长没有不利影响，培养出的小球藻安全无毒。

背景技术

小球藻为绿藻门小球藻属(Chlorella)单细胞绿藻，分布广泛，环境适应能力强、生长周期短，是一种新型的低碳环保资源。小球藻含有丰富的蛋白质、多糖、脂类、叶绿色、维生素和一些生物活性物质，广泛应用于保健食品、饲料、食品添加剂、精细化工品和医药制剂原料，具有重要的开发潜力。

目前，人类获取小球藻资源最主要的方式是规模化人工培养。然而，在小球藻培养过程中，因重力、曝气不均和小球藻本身生理特性等，培养装置内壁或与藻液接触的物件上常常会出现贴壁现象。“贴壁”是指在微生物(例如，细菌、真菌、微藻、细胞等)培养过程中，出现的生物污垢贴在培养装置内壁上的现象。小球藻细胞一旦发生贴壁，将产生恶性循环并形成不利影响，使小球藻生长缓慢甚至死亡，培养效果不断下降，甚至导致整个培养体系崩溃。有人提议：可以利用有机硅的防粘性，把它涂在小球藻培养装置内壁表面上，以降低表面附着力，提高表面的光滑度和疏水性，减少小球藻的贴壁，如专利CN102040909A一种低弹性模量有机硅防污材料的制备方法，这样虽然能解决小球藻的贴壁问题，但在小球藻的培养装置内壁表面涂有机硅防污材料就会挡住太阳光光线，不利于小球藻的生长。因此，在以往的小球藻的生产工艺中，贴壁发生后有两种处理方式：1、在收获小球藻后，进行培养装置的清洗，如专利CN102000679A管道光生物反应器管内壁的清理方法，这样虽然解决了小球藻贴壁的问题，但这样的方式增加了人力、物力，也就增加了生产成本；2、在小球藻的培养液中添加消泡剂，利用消泡剂中有机硅的低表面张力和低表面能的特性，达到有效减少或防止小球藻的贴壁的目的，如专利CN103184155A减少或防止微藻贴壁的方法及微藻培养方法，虽然这样也能解决小球藻贴壁的问题，但并未说明小球藻在含有有机硅培养液中的代谢问题，会造成有机硅或多或少会残留在小球藻中，提取的小球藻若应用于保健品、食品、饲料等食用方面，则会影响人类或动物的健康。

因此，如何在节约培养成本的前提下，减少贴壁并保证小球藻质量，在小球藻的培养过程中就显得十分重要，然而到目前为止，国内外还没有能够在保证小球藻质量同时，真正有效防止小球藻培养过程中贴壁的方法。

发明内容

本发明提供一种减少小球藻贴壁的培养方法，在小球藻培养液中加入适量的乳化剂，通过加入的乳化剂能与小球藻的生物污垢结合悬浮于培养液中，从而有效减少小球藻贴壁现象，该方法不仅可以延缓培养装置的清洗，减少清洗的次数，降低培养成本，而且不会对小球藻的生长有不利影响，更重要的是培育出的小球藻安全、无毒，特别适合作为保健品、饲料、食品添加剂、精细化工品和医药制剂原料。

本发明公开一种减少小球藻贴壁的培养方法，该方法包括如下步骤：

(1)以新鲜自来水为溶剂，配制BG-11培养液，所述的BG-11培养液成分(g/L)：

1)母液1：NaNO₃，1.5；MgSO₄·7H₂O，7.5×10^-2；CaCl₂，3.6×10^-2；柠檬酸，6.5×10^-3；EDTANa₂·2H₂O，1.0×10^-3；

2)母液2：柠檬酸铁铵，6.0×10^-3；；

3)母液3：K₂HPO₄，1.75×10^-1；