[发明专利]一种木聚糖酶的生产方法

权利要求书

1.一种木聚糖酶的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将毕赤酵母菌种按照质量百分比6%～12%的接种量接种到毕赤酵母一级种子培养基中，保持溶氧25%～55%，28℃～30℃培养8h～12h，得到毕赤酵母一级种子液，将里氏木霉的菌种按照质量百分比10%～15%的接种量接种到里氏木霉一级培养基中，保持溶氧25%～55%，28℃～32℃培养16h～20h，得到里氏木霉一级种子液；

（2）将步骤（1）中得到的毕赤酵母一级种子液按照质量百分比6%～12%的接种量接种到毕赤酵母二级种子培养基中，保持溶氧25%～55%，28℃～30℃培养8h～12h，得到毕赤酵母二级种子液，将步骤（1）中得到的里氏木霉一级种子液按照质量百分比10%～15%的接种量接种到里氏木霉二级培养基中，保持溶氧25%～55%，28℃～32℃培养16h～20h，得到里氏木霉二级种子液；

（3）将步骤（2）中得到的毕赤酵母二级种子液按照质量百分比6%～12%的接种量接种到发酵培养基中，保持溶氧25%～55%，pH4.2以上，转速100rpm～120rpm，28℃～32℃培养36h～42h，将步骤（2）中得到里氏木霉二级种子液按照质量百分比10%～15%的接种量接种到上述经毕赤酵母发酵过的发酵培养基中，保持温度、溶氧、pH条件不变，转速150rpm～170rpm培养16h～18h，按照质量百分比0.5%～5%的加量加入诱导物，保持温度、溶氧、pH条件不变，转速220rpm～240rpm培养72h～78h后得到木聚糖酶发酵液，其中发酵培养基的成分为：120g/L～150g/L原糖蜜，70g/L～90g/L玉米DDGS，0.5g/L～1g/L磷酸二氢铵，0.5g/L～0.75g/L碳酸钙，0.4g/L～0.75g/L硫酸锰，0.05g/L～0.1g/L蛋白酶，0.5g/L～0.75g/L植酸酶，所述诱导物由以下方法制得：将甘蔗渣粉碎至长度0.5mm～1.5mm，用高能电子辐照加速器能量范围6MeV～8MeV辐照8min～10min；

（4）将步骤（3）得到的发酵醪液进行板框压滤，澄清后超滤浓缩到所需要的酶活力；

（5）向步骤（4）得到的滤液中加入质量百分比0.05%～0.5%的防腐剂和质量百分比15%～25%的保护剂，灌装成为成品木聚糖酶；

其中，步骤（1）和步骤（2）中，毕赤酵母的一级种子培养基和二级种子培养基成分为：15～25g/L葡萄糖,10～20g/L原糖蜜,10～15g/L酵母浸膏,10～15g/L蛋白胨，1～2g/L磷酸二氢铵；步骤(1)和步骤(2)中，里氏木霉的一级种子培养基和二级种子培养基成分为：15～25g/L葡萄糖，8～12g/L原糖蜜，15～25g/L酵母浸膏，0.5～1g/L硫酸铵，0.25～0.5g/L硫酸锰，0.25～0.5g/L硫酸锌。

2.根据权利要求1所述的木聚糖酶的生产方法，其特征在于，步骤（5）中所述防腐剂由以下质量分数的各组分组成：35%～45%氯化钠、20%～35%山梨酸钾、15%～30%丙酸钠、10%～25%脱氢乙酸钠。

3.根据权利要求1所述的木聚糖酶的生产方法，其特征在于，步骤（5）中所述保护剂由以下质量分数的各组分组成：40%～50%甘油、35%～45%山梨醇、10%～20%海藻糖。

4.根据权利要求1所述的木聚糖酶的生产方法，其特征在于，步骤（3）为，将步骤（2）中得到的毕赤酵母二级种子液按照质量百分比10%的接种量接种到发酵培养基中，保持溶氧25%～55%，pH4.2以上，转速115rpm，29℃培养40h，将步骤（2）中得到里氏木霉二级种子液按照质量百分比12%的接种量接种到发酵培养基中，保持温度、溶氧、pH条件不变，转速160rpm培养18h，按照质量百分比2%的加量加入诱导物，保持温度、溶氧、pH条件不变，转速230rpm培养72h后得到木聚糖酶发酵液。

5.根据权利要求1所述的木聚糖酶的生产方法，其特征在于，步骤（3）中，所述发酵培养基的成分为：125g/L原糖蜜，75g/L玉米DDGS，0.75g/L磷酸二氢铵，0.6g/L碳酸钙，0.5g/L硫酸锰，0.075g/L蛋白酶，0.6g/L植酸酶。