[发明专利]一种B型禽偏肺病毒F蛋白有效
申请号: | 201610236529.2 | 申请日: | 2016-04-14 |
公开(公告)号: | CN105693829B | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 刘新文;范根成;胡潇;宫晓;李陆梅;刘蕾 | 申请(专利权)人: | 青岛易邦生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/115 | 分类号: | C07K14/115;C12N15/45;A61K39/155;A61P31/14 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 曾庆国 |
地址: | 266114 山东省青岛市红岛*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 型禽偏 肺病 蛋白 | ||
本发明提供一种B型禽偏肺病毒F蛋白,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明的F蛋白可用于制备疫苗。本发明的F蛋白制备的B型禽偏肺病毒亚单位疫苗具有抗原稳定性高,纯度高,特异性强,不产生其他不相关抗体,检测方法方便准确的特点,为工业化生产B型禽偏肺病毒亚单位疫苗奠定了坚实的基础。
技术领域
本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及一种B型禽偏肺病毒F蛋白。
背景技术
禽偏肺病毒属于副黏病毒肺病毒属,基因组为不分节段的单股负链RNA,可引起火鸡发生呼吸道疾病,称为火鸡鼻气管炎;感染鸡后引起病毒性气囊炎,鼻气管炎和肿头综合征,产蛋下降。20世纪70年代末,禽偏肺病毒引起的疾病首次在南非报道,随后在北美、南美、中东、远东都有发生。1989年美国首次分离到此病毒。在分离此病毒的同时,往往可分离到波氏杆菌、巴氏杆菌、假单胞杆菌、鼻气管炎鸟疫杆菌、粪产碱杆菌等。禽偏肺病毒能使气管纤毛的活动受到抑制,气管中的灰尘向外排出困难,灰尘中所带的大量细菌很容易发生继发感染,侵害呼吸道。病原禽偏肺病毒可分为三个型:A型感染火鸡,B型感染肉鸡,C型只在美国存在,A和B两型有交叉保护作用,与C型无交叉保护作用。随着我国禽业养殖规模的不断扩大,因禽偏肺病毒感染导致的继发感染也日益严重,对养禽业的危害非常严重,唯一有效办法是通过接种疫苗来预防鸡群的发病。
现有的禽偏肺病毒疫苗均为传统疫苗,是使用完整的病原体作为制苗用抗原。传统的灭活疫苗和弱毒疫苗,具有独特的优势如免疫后抗体均一,抗体效价也较高,但目前制造疫苗使用的毒株与临床流行毒株的抗原性存在较大差异,从而影响了攻毒保护效果,制约灭活疫苗的应用。弱毒疫苗的另一个问题是可能出现毒力返强的问题,存在接种疫苗后发病的情况,生物安全不能完全保证。而且,使用全病毒抗原制备的传统疫苗免疫后产生的抗体,在临床上无法区分野毒感染或是疫苗免疫产生,干扰疫情的监测。这是目前传统疫苗存在的不足。为解决传统疫苗的问题,就需要筛选新的毒株或者开发新的亚单位疫苗以克服现有疫苗的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种B型禽偏肺病毒F蛋白,即一种新型的B型禽偏肺病毒抗原,从而弥补现有技术的不足。
本发明首先提供一种B型禽偏肺病毒F蛋白,包含有:
1)氨基酸序列为SEQ ID NO:1的蛋白,
2)在1)的蛋白上取代、缺失、添加一个或几个氨基酸,且具有1)中蛋白功能的蛋白;
编码上述F蛋白的基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:2;
本发明的F蛋白可用于制备疫苗,优选为亚单位疫苗。
本发明的F蛋白制备的B型禽偏肺病毒亚单位疫苗具有抗原稳定性高,纯度高,特异性强,不产生其他不相关抗体,检测方法方便准确的特点,为工业化生产B型禽偏肺病毒亚单位疫苗奠定了坚实的基础。
附图说明
图1:本发明实施例1的F基因PCR扩增鉴定图;
图2:本发明F基因的核苷酸序列比对图;
图3:本发明F蛋白的氨基酸序列比对图;
图4:本发明实施例高效表达载体的酶切鉴定图;
图5:本发明实施例重组菌株X33-F的PCR鉴定图;
图6:本发明实施例重组菌发酵诱导表达产物的SDS-PAGE电泳检定图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细的说明。
实施例1:F蛋白的扩增及序列分析
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