[发明专利]胡桃醌在制备TRAIL增敏剂中的用途

说明书

技术领域

本发明属生物医学领域，涉及天然药物活性成分胡桃醌新的药用用途，具体涉及胡桃醌在制备TRAIL增敏剂中的用途。

背景技术

有关文献公开了肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族的新成员。研究显示，所述的TRAIL与死亡受体结合,通过多种信号传导通路,诱导肿瘤细胞发生快速、高效的凋亡反应,而对正常细胞无明显毒性,有望成为一种新的肿瘤治疗手段。然而越来越多的研究表明,有若干肿瘤细胞对TRAIL的凋亡作用敏感性较低甚至完全耐受，因此，对TRAIL抗肿瘤疗效增敏显得十分必要。

胡桃醌存在于胡桃科植物胡桃及其同属植物黑核桃的未成熟的外果皮中。近年来的研究发现胡桃醌具有抗真菌、抗衣原体或抗HIV病毒、抗肿瘤、降血糖等生物活性。迄今，尚未见有关胡桃醌作为TRAIL增敏剂的报道。

基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供天然药物活性成分胡桃醌新的药用用途，尤其是胡桃醌在制备TRAIL增敏剂中的用途。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供天然药物活性成分胡桃醌新的药用用途，尤其涉及胡桃醌在制备TRAIL增敏剂中的用途。

本发明所述的胡桃醌具有如下化学结构：

本申请进行了细胞试验，本发明的实施例中优选人黑色素瘤细胞株MEWO和A2058，分别检测单独应用TRAIL以及联合应用胡桃醌和TRAIL对上述细胞株的细胞毒性影响，以及对细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响，结果显示：单独应用TRAIL对人黑色素瘤细胞株(MEWO和A2058)细胞增殖和凋亡无明显作用；胡桃醌和TRAIL联合应用能显著增强后者对上述两种肿瘤细胞株的杀伤作用。

本发明进一步提供一种具有TRAIL增敏作用的药物组合物，其包括作为活性成分的胡桃醌，以及药物学上可接受的载体。

本发明中，所述的药物组合物中作为活性成分的胡桃醌可用于多种肿瘤的TRAIL增敏；本发明中，优选的肿瘤是黑色素瘤。

附图说明

图1，胡桃醌增强TRAIL对肿瘤细胞的杀伤作用，

其中，A，胡桃醌化学结构图；B药物对MEWO细胞杀伤率；C，药物对A2058的杀伤率；T为TRAIL的缩写，浓度为25nM，JL为胡桃醌缩写。

图2，胡桃醌增强TRAIL对肿瘤细胞的诱导凋亡作用，

其中，A，药物对MEWO细胞凋亡影响(流式图)；B，药物对A2058细胞的凋亡影响(流式图)；C，药物对MEWO和A2058凋亡影响(凋亡率统计图)；T为TRAIL的缩写，浓度为25nM，JL为胡桃醌缩写，浓度为20μM。

图3.胡桃醌增强TRAIL对肿瘤细胞的促凋亡蛋白表达，

其中，A，药物对A2058细胞促凋亡蛋白PARP和caspase 3的影响(wesetern blot图)；B，药物对A2058细胞促凋亡蛋白(PARP、cleaved PARP)的影响(灰度值统计图)；C，药物对A2058细胞促凋亡蛋白(caspase3和cleaved caspse 3)的影响(灰度值统计图)；T为TRAIL的缩写，浓度为25nM。JL为胡桃醌缩写，浓度为20μM。

具体实施方式

实施例1

材料与方法：

1.细胞株：人黑色素瘤细胞株(MEWO、A2058)均购自ATCC。上述细胞株用含有10％胎牛血清的DMEM培养基在37℃、体积分数为5％CO₂、完全饱和湿度条件下常规培养，48h更换培养基，细胞生长达饱合状态时，用0.25％胰蛋白酶+0.02％EDTA消化传代，2～3d传代1次，实验选用对数生长期细胞。