[发明专利]一种乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于植物营养素提取技术领域，具体涉及一种乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖的分离纯化方法。

背景技术

植物多糖，又称植物多聚糖，是植物细胞代谢产生的聚合度超过10个的聚糖。植物多糖具有生物活性，对人体具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、保护肝脏等保健作用。

植物多糖具有贮藏生物能(如：淀粉、糖原、菊粉)和支持结构(如：纤维素、几丁质、粘多糖)的作用。但是，细胞膜和细胞壁的多糖成份不仅是支持物质，而且还直接参与细胞的分裂过程，在许多情况下成为细胞和细胞、细胞和病毒、细胞和抗体等相互识别机构的活性部位。

多糖无甜味，在水中不能形成真溶液，只能形成胶体，无还原性，无变旋性，但有旋光性。食品工业中常见的酵母菌在一定条件下可发酵产生具有生物活性的细胞多糖，这些多糖物质在食品中具有相当重要的应用价值。

乌饭树属杜鹃花科植物，又名南烛、古称染菽等，在中国主要分布于华东、华中、华南等地，尤以江、浙、闽一带为多见。乌饭树的药用历史悠久，中医认为乌饭树叶性平、味淡,其叶汁含有名贵的天然黑色素，有松弛血管、改善血液循环的作用，也可以预防动脉硬化、糖尿病等，还可以治疗牙龈腐烂，食用和药用价值高。直到今天，在我国南方省份的部分地区，人们每到农历四月初八，仍喜食用其树叶浸渍糯米煮成乌饭的习俗，据今已有2000多年的历史。乌饭树叶除了含有大量的蛋白质、维生素外，还富含植物多糖。

蓝莓(blueberry)，又称越橘、蓝浆果，属杜鹃花科越橘属多年生落叶或常绿灌木。蓝莓是一种耐寒性极强的野生植物，可抵御零下-50℃的严寒，原产于北美、苏格兰和俄罗斯，是一种森林中天然生长的野生资源。蓝莓因具有独特风味及营养保健功能，如抗氧化防衰老、改善记忆和视力、消炎抗菌、治疗心血管疾病等，被联合国粮农组织列为人类五大健康食品之一。研究表明蓝莓叶中富含植物多糖成分，但是对于蓝莓叶中的多糖进行提取利用还鲜有报道。

发明内容

本发明提供一种乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖的分离纯化方法。所述方法以新鲜乌饭树叶和蓝莓叶为原料，采用纯天然植物提取加工方法，产品为乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖，分离纯化过程中无药物残留、无污染物，所提取多糖是纯天然绿色产品。通过所述方法可以将乌饭树叶和蓝莓叶中富含的多糖成分提取出来，造福人类。

为实现上述目标，本发明采用以下技术方案：

一种乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖的分离纯化方法，以新鲜乌饭树叶和蓝莓叶为原料，采用超声波技术实施细胞破碎，以碱性溶液实施多糖提取，以复合生物酶实施粗糖提纯，得到纯天然的植物多糖成分。

所述方法包括下列步骤：1）乌饭树叶和蓝莓叶细胞壁破壁；2）乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖粗步分离；3）乌饭树叶多糖的进一步纯化；4）蓝莓叶多糖的进一步纯化。

所述乌饭树叶和蓝莓叶细胞壁破壁过程为：以乌饭树叶和蓝莓叶为原料，对新鲜乌饭树叶和蓝莓叶进行清洗后，采用超声波破碎法实施细胞壁破壁，选择超声波的频率为50kHz，实施超声波破碎3次，每次10分钟；然后在破碎液中加入重量比1:1的纯化水，进入胶体磨研磨，选择研磨细度为10μm、研磨5次；接着将研磨液在-15℃环境下冷冻1小时，再置于80℃水中骤然升温使其融化，升温作用15分钟，待研磨液冷却至室温后再将其放入-15℃环境下冷冻1小时，如此反复3次。

所述乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖粗步分离过程为：首先，采用重量浓度为1%的KOH溶液，按照KOH溶液与细胞壁液的质量比为4:1的标准，将处理后的破壁细胞壁液在温度为4℃的氮气保护下搅拌萃取20小时；其次，将萃取液经过离心取上清液；再次，用KOH溶液对沉淀物重复萃取2次，并取上清液；最后，将提取的上清液经过超滤、冷冻、干燥即得乌饭树叶多糖和蓝莓叶多糖粗品。

所述乌饭树叶多糖的进一步纯化过程为：首先，按照复合酶A与乌饭树叶多糖粗品的质量比为万分之五的标准，采用复合酶A对乌饭树叶多糖粗品在55℃、pH值为7.8的条件下处理6小时；其次，在处理后的溶液中加入95%乙醇至乙醇重量浓度为50%，离心后取沉淀；再次，对沉淀物加水复溶后，加入95%乙醇至乙醇重量浓度为70%，进行二次醇沉；最后，经离心获得的沉淀物即为乌饭树叶多糖产品。