[发明专利]一种同时表达n个蛋白或蛋白亚基的方法及其专用系统有效
申请号: | 201610248592.8 | 申请日: | 2016-04-20 |
公开(公告)号: | CN107304432B | 公开(公告)日: | 2020-11-17 |
发明(设计)人: | 翟宇佳;孙飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院生物物理研究所 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/866;C07K19/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100101 北京市朝阳区大屯路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 表达 蛋白 方法 及其 专用 系统 | ||
1.一种同时表达Alpha亚基、Beta亚基、Beta’亚基、Gamma亚基、Delta亚基、Epsilon亚基和Zeta亚基的系统,包含DNA甲和DNA乙;
所述DNA甲的核苷酸序列的反向互补序列如序列表中序列3自5'末端起第3992至第12927位所示;
所述DNA乙的核苷酸序列如序列表中序列3自5'末端起第12951至第22314位所示;
所述DNA甲和所述DNA乙存在于同一质粒;所述质粒是以重组质粒pFBD-mCEG为出发质粒,插入所述DNA甲和所述DNA乙得到的;所述重组质粒pFBD-mCEG为将质粒pFastbac-Dual的限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ的识别序列间的DNA小片段替换为核苷酸序列是序列表的序列1所示的DNA分子,得到的重组质粒;
所述Alpha亚基、所述Beta亚基、所述Beta’亚基、所述Gamma亚基、所述Delta亚基、所述Epsilon亚基和所述Zeta亚基组成人源COPI复合体。
2.一种转移载体,其核苷酸序列如序列表中序列3所示。
3.权利要求1所述的系统在同时表达Alpha亚基、Beta亚基、Beta’亚基、Gamma亚基、Delta亚基、Epsilon亚基和Zeta亚基中的应用。
4.权利要求2所述转移载体在同时表达Alpha亚基、Beta亚基、Beta’亚基、Gamma亚基、Delta亚基、Epsilon亚基和Zeta亚基中的应用。
5.一种同时表达Alpha亚基、Beta亚基、Beta’亚基、Gamma亚基、Delta亚基、Epsilon亚基和Zeta亚基的方法,包括如下步骤:将权利要求2所述转移载体转化受体菌并培养,获得重组杆状病毒穿梭载体;将所述重组杆状病毒穿梭载体转染昆虫细胞,继而表达所述Alpha亚基、所述Beta亚基、所述Beta’亚基、所述Gamma亚基、所述Delta亚基、所述Epsilon亚基和所述Zeta亚基。
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