[发明专利]蛋白激酶mTOR的S2481位点磷酸化作为肿瘤用药的标志物

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及蛋白激酶mTOR的S2481位点磷酸化作为肿瘤用药的标志物。

背景技术

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是世界范围内最为流行的恶性肿瘤之一。在欧美国家，原发性的肝癌患者较少，且多由其他类型肿瘤的转移到肝脏引发。而在东南亚地区和撒哈拉沙漠以南的地区，特别是在中国，肝癌患者则大多是原发性肝癌。肝癌发生发展的过程与多个基因的突变以及多条信号通路密切相关。针对这些分子机制，肝癌的靶向治疗逐步受到重视。

Sorafenib是一类小分子抑制剂，能够抑制多种蛋白激酶的活性，包括VEGFR、PDGFR以及Raf等。在2007年的ASCO会议上，Josep M.Llovet等人公布了sorafenib在肝癌中的临床试验治疗效果。对于肝癌患者，sorafenib相比对照药，其疗效提高了44％，病人的平均存活时间延长了3个月。在2007年11月，美国FDA批准sorafenib作为晚期肝癌的一线用药。Sorafenib的出现无疑给众多肝癌患者带来了希望，但是sorafenib的抗药性使得其对于肝癌的总体治疗效果仍然难以让人满意。有研究表明除了受sorafenib抑制的Raf通路在肝癌发生发展中有重要功能之外，mTOR信号通路与肝癌的发生发展也有密切的关系。Josep M.Llovet等人发现无论是在细胞水平还是动物模型的水平，联合使用Raf通路的抑制剂sorafenib和mTOR通路的抑制剂rapamycin可以展现出更强的抗肿瘤效应。mTORC1能够活化S6K，调控蛋白质的合成过程，促进细胞从G1期向S期转变，从而促进肝癌细胞的增殖。此外，有15-41％的肝癌病人中mTOR通路是过度活化的。在肝癌的动物模型里，mTOR的抑制剂也具有抗肿瘤效应。日本国立癌症研究院的Masuda等人利用大量不同的磷酸化位点特异性抗体，对肝癌患者的标本进行了大规模筛查，发现高水平的p-RPS6S235/236可能是sorafenib治疗无效的分子标记。并且发现在sorafenib抵抗的肝癌细胞里，mTOR信号通路是活化的，mTOR的抑制剂能够显著抑制sorafenib抵抗的肝癌细胞的增殖。首都医科大学附属佑安医院卢实春等人发现雷帕霉素(sirolimus，西罗莫司)能够降低早中期肝癌病人肝移植术后的远期肿瘤复发率，并提高其术后生存率。这些研究成果提示sorafenib和sirolimus都对肝癌患者有一定疗效，但是在什么情况下使用哪一种药物的个性化用药依据目前未知。

胃癌在我国各种恶性肿瘤中居首位，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。病因主要有地域环境及饮食生活 因素、幽门螺杆菌感染、癌前病变以及遗传和基因等几个因素。

蛋白激酶mTOR除了在肝癌组织中高表达以外，有证据表明mTOR在胃癌组织中也有异常表达。

发明内容

本发明的一个目的是提供mTOR信号通路抑制剂的用途。

本发明提供的mTOR信号通路抑制剂在如下1)-3)中至少一种中的应用：

1)制备抑制肿瘤细胞或肿瘤组织中mTOR S2481位点磷酸化水平的产品；

2)制备抑制肿瘤细胞增值的产品；

3)制备抑制器官移植后肿瘤患者复发的产品。

上述应用中，所述肿瘤细胞或肿瘤组织为mTOR S2481位点磷酸化水平高的肿瘤细胞或肿瘤组织。

所述肿瘤细胞为肝癌细胞或胃癌细胞；

所述肿瘤组织为肝癌组织或胃癌组织。

所述肿瘤细胞或肿瘤组织为mTOR S2481位点磷酸化水平高的肿瘤细胞或肿瘤组织；mTOR S2481位点磷酸化水平高的肿瘤细胞为HCCLM6细胞；mTOR S2481位点磷酸化水平高的肿瘤组织为中期或晚期病人的肿瘤组织。

mTOR S2481位点磷酸化水平高的肿瘤细胞或肿瘤组织为满足如下的样品：

样品的质谱数据通过生物信息学的计算方法，符合如下1)-3)全部：

1)、肿瘤细胞或肿瘤组织中mTOR底物位点占磷酸化网络位点的比值，这个值>14％

2)、肿瘤细胞或肿瘤组织中mTOR底物位点数目与癌旁中比值，这个值>1.2

3)、做卡方检验的p值<0.05。

反之，不符合1)-3)全部，则不为mTOR S2481位点磷酸化水平高。