[发明专利]白术提取物在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物方面的应用有效
申请号: | 201610251396.6 | 申请日: | 2016-04-20 |
公开(公告)号: | CN105832797B | 公开(公告)日: | 2017-10-13 |
发明(设计)人: | 胥振国;蔡玉华;刘修树;范高福;王凤华;方丽波;袁星;向敏;黄鹤春;宫斌 | 申请(专利权)人: | 合肥职业技术学院 |
主分类号: | A61K36/284 | 分类号: | A61K36/284;A61P31/02 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白术 提取物 及其 抗耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 方面 应用 | ||
技术领域
本发明涉及中药医疗领域,具体涉及一种白术提取物及其在抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方面应用。
背景技术
白术为菊科植物白术的干燥根茎。白术中含有多糖、苍术酮、白术内酯、挥发油、氨基酸及树脂等成分,其对调节胃肠运动、调节免疫、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老都具有一定的药理作用。白术非极性部位提取物,包括挥发油,具有很强的生物活性,目前主要用于制成抗肿瘤的药物或保健品等,还少有用于抑菌治疗方面的报道。
申请号为201510770416.6的发明申请公开了“具有抗帕金森作用的白术内酯提取物、制备方法及其应用,提取出白术中的有效成分白术内酯用于治疗帕金森,其中加入了双氧水对白术进行氧化,用锌粒保护氧化的产物,这种提取白术内酯的方法有可取之处,但是,并没有考虑到双氧水易挥发,高温易分解,分解产物为大量的氧气具有危险性等问题,而锌粒在提取物中虽然起到保护作用,但是由于锌粒为固体,在提取过程中容易堵塞提取管道,不方便流动,也没有其他影响功效,使用不方便,如需使用,需要对该方法进行改进。
金黄色葡萄球菌是临床十分常见的病原菌之一,自1961年研究人员首次分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)以来,其临床检出率逐年上升,20世纪80年代后期已成为全球性的病原菌,居于医院感染病原菌首位。由其引起的感染与乙型肝炎、艾滋病并列为世界范围内的三大难以解决的感染性疾病。由于其致病力强,传播速度快,常出现多重耐药性,在医院内播散可导致病区内的暴发流行。当人体抵抗力低下时趁虚而入,对人体组织器官造成化脓性炎症甚至会引起脑膜炎、心内膜炎和败血症等危重的致死性疾病。尤其是近几年来,对糖肽类抗生素万古霉素和替考拉宁的敏感性降低,因此十分迫切的需要研发可替代抗生素的药物。
中草药治疗细菌性感染疾病,其最大的优点就是不易产生耐药性,并且中药的毒副作用较小,抑菌作用广泛,被机体吸收后能够增进机体抵抗病原微生物的能力。虽然对治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的药物中含有白术,但是对于采用不同的提取方法从白术得到提取物也是不同的。使用本发明的提取方法得到白术提取物对金黄色葡萄球菌进行摸索性的体内外的抑菌研究,期望白术提取物未来可以抗菌药物治疗金黄色葡萄球菌引起的疾病。
发明内容
本发明所要解决的问题是提供一种白术提取物及其在抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方面应用。
为了实现上述目的,本发明采取的技术方案为:一种白术提取物,该提取物的制备方法包括:
(1)取白术药材或饮片粉碎过60目筛,20-30℃条件下用双蒸水冲洗干净,离心得到固体,并加入双蒸水浸泡6-12h,再离心后,得到的固体经恒温箱内干燥,温度控制在40-50℃,得到白术粉末;
(2)室温下,向白术粉末中加入1-3倍体积的过氧化氢水溶液和 0.1-0.5%的焦磷酸钠搅拌0.5-1h后,抽滤滤取白术处理粉末;
(3)将步骤(2)中得到的白术处理粉末置于通风橱内用紫外灯进行照射,连续照射10次,每次1-3min,每次照射后对白术处理粉末进行翻摊;
(4)将步骤(3)中的得到的粉末通过减压干燥的方法在真空干燥箱中进行烘干,烘干的温度为40-50℃;
(5)在白术处理粉末中掺入10-20%抗坏血酸,加入1-2倍30-50%乙醇溶液进行超声微波提取10-30min,功率为200-300W;
(6)将步骤5中所得到的提取液可采用色谱法、回流法进行分离纯化;
具体提取步骤如下:
色谱法:将提取液过聚酰胺树脂柱,依次用2-4倍柱体积的水、 3-5倍柱体积的20%-40%乙醇、2-3倍柱体积的60%-90%乙醇洗脱,控制洗脱液流速为1-2倍柱体积/h;合并洗脱液。
回流法:将提取液用5-12倍30-50%乙醇溶液60-70℃回流提取 6-8h,抽滤,回收滤液。
(7)将步骤6中得到白术提取液可采用低温重结晶法、减压浓缩法得到最终的白术提取物。
具体提取步骤如下:
低温重结晶法:加入1-2倍体积的加热至沸腾的乙醇,加到白术提取液中,用冰水冷却乙醇,有结晶析出,过滤,收集析出的晶体,得到白术提取物。
减压浓缩法:将白术提取液用0.2μm微滤膜进行微滤澄清,将分离液减压浓缩,冷冻干燥,得到白术提取物。
优选的,该提取物的最优制备方法:
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