[发明专利]一种提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法在审
申请号: | 201610254740.7 | 申请日: | 2016-04-23 |
公开(公告)号: | CN107304410A | 公开(公告)日: | 2017-10-31 |
发明(设计)人: | 胡卓汉;孙易;余斐斐;李楠 | 申请(专利权)人: | 瑞德肝脏疾病研究(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 201203 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 冻原 肝细胞 复苏 细胞 活性 方法 | ||
1.一种提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法,其特征在于,其包括:
将冷冻的原代肝细胞从液氮中取出,水浴解冻后,将原冻存细胞液直接加入到含有1 ml的incubation buffer,台盼蓝染色后,细胞计数并计算细胞活率;然后继续用incubation buffer将细胞密度稀释到试验所需条件。
2.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的液氮为-160°C。
3.按权利要求1所述的方法,其特征在于,其中将原冻存细胞液1 ml直接加入到含有1 ml的incubation buffer。
4.按权利要求1所述的方法,其特征在于,其中采用37°C水浴解冻。
5.按权利要求1所述的方法,其特征在于,将细胞密度稀释到试验所需条件后根据试验需求,铺板培养或者直接使用。
6.权利要求1所述的提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法在用于药物在肝细胞中的代谢稳定性以及肝细胞对药物的摄取评价试验中的用途。
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