[发明专利]一种鲍特菌选择性培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，提供一种鲍特菌选择性培养基及其应 用。

背景技术

鲍特菌主要包括百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌，是儿科领域非常重 要的呼吸道感染病原菌，百日咳鲍特菌引起的疾病称为百日咳，属于国家 法定的乙类传染病。副百日咳鲍特菌感染引起的疾病为百日咳综合征，不 属于传染病范畴。近年来，百日咳在很多发达国家的发病率大幅度上升， 成为全球儿童感染领域的热点问题。我国儿童基数庞大，儿科百日咳样咳 嗽的患儿数量大，季节性明显，但因检测手段有限，细菌培养困难，导致 临床上百日咳的病原诊断非常困难，很多可能的百日咳患儿被笼统诊断为 百日咳综合征，严重影响百日咳患儿的治疗和防控。

细菌培养是感染性疾病病原诊断的金标准，目前国内无该培养该菌的 培养基成品。国外有可用于百日咳杆菌培养的碳琼脂培养基干粉(OXOID Company,England)，成分含牛肉浸粉、蛋白胨、淀粉、细菌学木炭、氯化 钠、烟酸和琼脂粉，使用的选择性鲍特菌培养基添加物为头孢氨苄，加入 5％脱纤维马血可配制成鲍特菌选择性培养皿。但根据该配方配制的培养基 因对其他细菌的抑制效果不理想，导致百日咳鲍特菌等细菌的分离率很低。 而且，上述碳琼脂培养基干粉和添加物在中国未经注册，因此在中国境内 的医院无法合规采购和使用。

发明内容

本发明的一个目的是针对国内目前尚无鲍特菌选择培养基、且国外现 有选择性鲍特菌培养基配方对百日咳杆菌等鲍特菌选择性欠佳的现状，提 供一种培养效率较高的鲍特菌选择性培养基平皿成品。

本发明鲍特菌选择性培养基配方按照质量百分比计算，包括：含蒸馏 水85.7～87﹪、脱纤维羊血8.6～9.5﹪、琼脂粉1.0～1.2﹪、牛肉浸粉0.85～ 0.95﹪、蛋白胨0.85～0.95﹪、淀粉0.85～0.95﹪、氯化钠0.43～0.48﹪、 细菌学木炭0.34～0.39﹪、烟酸7.5×10^-5～9.5×10^-5﹪和万古霉素1×10^-3～ 2×10^-3﹪。

本发明的另一个目的是上述鲍特菌选择性培养基在儿童呼吸道感染病 原检测试剂盒中的应用，优选在百日咳检测试剂盒中的应用。

本发明的有益效果如下：

使用本发明的选择性培养基平皿能有效培养出百日咳鲍特菌、副百日 咳鲍特菌、支气管败血性鲍特菌等鲍特菌属的所有细菌，特别是在百日咳 的诊断中起金标准作用。

附图说明

图1为百日咳患儿冯某同时采集的鼻咽拭子接种在现有对比鲍特菌选 择性培养基和本发明培养基上百日咳鲍特菌的生长情况比较。

图2为百日咳患儿蒋某同时采集的鼻咽拭子接种在现有对比鲍特菌选 择性培养基和本发明培养基上百日咳鲍特菌的生长情况比较。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的分析。

以下实施例所采用的脱纤维羊血购买自杭州康裕贸易有限公司，细菌 学琼脂粉和牛肉浸粉为青岛海博生物技术有限公司产品，蛋白胨购自英国 OXOID公司，马铃薯淀粉自制，细菌学木炭为定制木炭自行磨碎成粉末， 氯化钠为市售化学纯产品，烟酸为北京四环生物制药有限公司产品，万古 霉素为礼来公司产品；现有对比鲍特菌选择性培养基是国外配方，成分包 括碳琼脂培养基干粉(OXOIDCompany,England)、添加物头孢氨苄、5％ 脱纤维马血，其中这里所指代的碳琼脂培养基干粉成分含牛肉浸粉、蛋白 胨、淀粉、细菌学木炭、氯化钠、烟酸和琼脂粉。

实施例1-1：鲍特菌选择性培养基平皿的配制(以配制1000ml为例)

(一)碳粉培养基基础悬液的准备：将琼脂粉10～12g、牛肉浸粉8.5～ 9.5g、蛋白胨8.5～9.5g、马铃薯淀粉8.5～9.5g、氯化钠4.3～4.8g、细菌学 木炭3.4～3.9g、烟酸0.00075～0.00095g混合，加入857～870g水混合摇 匀。

(二)培养基平皿的配制

步骤(1)、将上述配好的混悬液置于121℃高温、0.11mpa高压灭菌 15分钟，然后凉至50℃；

步骤(2)、在无菌操作环境，将100ml脱纤维羊血(100g)缓慢加入 步骤(1)制备得到的培养基中，轻轻混匀；