[发明专利]一种二恶英样品分析方法

权利要求书

1.一种二恶英样品分析方法，其特征在于，包括烟道样品分析方法、空气样品分析方法、植物样品分析方法、土壤样品分析方法和水体样品分析方法；

所述烟道样品分析方法，具体包括以下步骤：

（1）首先将索氏萃取管之下端溶剂回流口以玻璃棉塞住，其下连接1000 mL烧瓶；

（2）将已折迭之石英纤维滤纸样品置入索氏萃取管底部，以镊子将泡棉由玻璃套筒中夹出置入索氏萃取管内，再以甲苯淋洗镊子及玻璃套筒并导入索氏萃取管；

（3）将内标准溶液添加在索氏萃取管内之泡棉上，随后以550-650mL之甲苯进行索氏萃取回流，调整热源令其每小时至少回流四次，萃取二十四小时后冷却至室温；

（4）上述之萃取液经减压浓缩至近干后，待进行净化程序，可将此合并液均分成二等份，若实行均分时，萃取前加入之内标准溶液用量应加倍，其中一份储存备用；

（5）取前述之已吹干之样品，以不超过200μL之二氯甲烷完全溶解试管内之物质，随后加入7 mL之正己烷，振荡4-6秒后加入替代标准品溶液40μL，再加入4 mL之浓硫酸，剧烈振荡15-25秒，进行第一次酸洗，静置分层；

（6）转移上层有机溶液至另一干净的试管中，有机溶液内再加入4mL之浓硫酸，振荡15-25秒，进行第二次酸洗，静置分层；

（7）各酸层再以7 mL之正己烷逐一溶洗两次，以100mL烧瓶收集所有有机溶中，再以真空减压浓缩至1-2mL，准备净化步骤；

（8）以10mL正己烷预洗酸性硅胶管柱，将完成酸洗之正己烷溶液直接转移至酸性硅胶管柱，全部转移完成后再以5 mL/次，共三次之正己烷流洗净化管柱，收集流洗液，准备进行酸性氧化铝管柱净化，酸性硅胶管柱编号储存；

（9）以10mL正己烷预洗酸性氧化铝，将完成酸性硅胶管柱之正己烷溶液直接转移至酸性氧化铝管柱，收集流洗液，编号储存；以2 mL/次，共四次之体积比为6/94的二氯甲烷/正己烷溶剂流洗酸性氧化铝管柱，流洗液收集，编号储存；

（10）以4 mL/次，共五次之体积比为60/40 的二氯甲烷/正己烷溶剂流洗酸性氧化铝管柱，流洗液收集后，在约37℃下以氮气吹除浓缩至1 -2mL后，以少量二氯甲烷溶洗容器上部内壁，再度浓缩至1-2mL后，移去热源，以氮气继续吹至近干，待进行活性碳净化；另将酸性氧化铝管柱编号储存；

（11）将管柱切口端朝下，依序以5-10 mL之甲醇、甲苯、体积比为75/20/5的二氯甲烷/甲醇/甲苯、体积比为50/50的环己烷/二氯甲烷及正己烷等溶剂预洗管柱，洗液丢弃；

（12）倒转管柱，令其切口端朝上，使用1 mL正己烷溶解试管样品，振荡20秒，溶液移入活性碳管柱，其次以2mL/次之体积比为50/50环己烷/二氯甲烷，共二次淋洗，均移入活性碳管柱，随后以2mL/次之同一溶剂，共二次流洗管柱；再以1mL/次之体积比为75/20/5的二氯甲烷/甲醇/甲苯，共二次流洗管柱；上述之所有流洗液皆合并收集，编号储存；

（13）倒转管柱，令切口端朝下，以甲苯30-50 mL流洗活性碳管柱，收集此流洗液并于37℃真空减压浓缩至近干，以少量二氯甲烷转移至共栓沉淀管中，于室温下以氮气继续吹除至干；以适量二氯甲烷多次淋洗管壁，以氮气缓缓吹除溶剂至干；

（14）分析前以注射针吸取20μL之回收率标准品加入共栓沉淀管中，以pipet转移至样本瓶中，上机分析；

所述空气样品分析方法，包括以下步骤：

（1）气相：将索氏萃取管之下端溶剂回流口以玻璃棉塞住，其下连接500 mL烧瓶，以镊子将泡棉由玻璃套筒中夹出置入索氏萃取管内，再以甲苯淋洗镊子及玻璃套筒并导入索氏萃取管；

（2）固相：将索氏萃取管之下端溶剂回流口以玻璃棉塞住，其下连接500 mL烧瓶，将已折迭之石英纤维滤纸样品置入索氏萃取管底部；

（3）上述两者之样品，皆须个别添加内标准溶液20 uL，随后以适量之甲苯进行索氏萃取回流，调整热源令其每小时至少回流四次，萃取16小时后冷却至室温；

（4）萃取液经减压浓缩至近干后，个别进行净化程序，若样品需执行分样时，萃取前加入之内标准溶液用量应加倍，一份进行分析、一份保存备用；

（5）取前述两者已执行分样之样品，进行酸性硅胶之净化程序；

（6）气、固相样品分别以15mL正己烷预洗酸性硅胶管柱，将样品之正己烷溶液直接转移至酸性硅胶管柱，全部转移完成后再以2 mL/次、共三次之正己烷流洗净化管柱，再以20mL/次、共四次之正己烷流洗净化管柱；收集流洗液准备进行活性碳管柱净化，酸性硅胶管柱贴上样品编号；

（7）将活化之活性碳管柱，依序以5-10 mL之甲醇、甲苯、体积比为75/20/5的二氯甲烷/甲醇/甲苯、体积比为50/50的环己烷/二氯甲烷及正己烷等溶剂预洗管柱，洗液丢弃；

（8）将完成酸性硅胶净化之两者样品分别以1 mL正己烷移入活性碳管柱，以2mL/次之正己烷2-3次溶洗样品，随后以体积比为50/50的环己烷/二氯甲烷12mL溶洗样品，再用6 mL之体积比为75/20/5的二氯甲烷/甲醇/甲苯流洗管柱，上述之所有流洗液为15-25mL，皆合并收集为 By Pass保留；

（9）倒转管柱，将管柱中的活性碳以甲苯冲提至另一中型管柱,，再取以另一新250mL的烧瓶准备盛装，用甲苯50-120 mL冲提活性碳管柱，收集此冲提液于37℃真空减压浓缩至近干，再以少量二氯甲烷转移至共栓沉淀管中，于室温下以氮气继续吹除至干，过程中以适量二氯甲烷2-3次淋洗管壁，持续以氮气缓缓吹除溶剂至干；

（10）分析前气、固相样品分别以注射针吸取20μL之回收率标准品加入共栓沉淀管中，以pipet转移至样本瓶中，上机分析；

所述植物样品分析方法，包括以下步骤：

（1）叶片经清洗后剪成2-3公分大小，置于铝箔上干燥，样品再移入不锈钢搅拌机或食品均质机内搅碎均匀，取10g于110±5℃烘4小时，计算其含水率，其余样品储存于棕色玻璃瓶；

（2）索氏萃取法：取干燥20g样品置入圆筒滤纸移入索氏萃取管，添加内标准品20μL, 10 pg/μL，以1:1Ace/Hex进行索氏萃取，萃取时间须大于20小时，待萃取完毕后静置至室温，以减压浓缩至近干；

（3）空白样品做法：除不含样品基质之外，其余皆与样品所使用到的器皿、溶剂、圆筒滤纸等相同，伴随样品一起分析；

（4）QCS从酸性硅胶步骤开始，添加PAR于Hexane中，伴随样品一起分析；

（5）分析流程：萃液先过酸性硅胶，再以Hexane洗净水洗净三次，以酸性氧化铝及活性碳净化后上机；

所述土壤样品分析方法，包括以下步骤：

（1）样品应先放置于干净的玻璃器皿中或铝箔纸上置于干净区域，先剔除石砾、树枝等杂物后，放置于土壤、废弃物风干室里自然风干或冷冻干燥；

（2）风干完成后，全量样品经过研磨使其通过 ≦1 mm标准筛，再充分混合均匀装入夹链袋内保存，待进行索氏萃取程序；

（3）固态样品在剔除杂物时应尽量将附着其上的样品回收，风干样品厚度最好不超过 15 mm；

（4）干燥、研磨、过筛等预处理工作，应在土壤、废弃物专用之排烟柜中进行，并避免样品间交互污染，敲碎或研磨、过筛后，皆应将样品重新混合；若检测样品量小于 2 g，则须另取经过 2 mm 筛的代表性样品至少 20 g 进一步研磨，使通过 250μm筛网后，再秤取样品；

（5）另取研磨过筛后之样品10g进行含水率测试，经秤重之样品以110±5℃烘12小时后，移入干燥箱内冷却，依下式计算含水率：

含水率 ﹪＝(样品湿重Ww-样品干重Wd)/ 样品湿重Ww × 100%

（6）准备预洗好的索氏萃取管及500mL烧瓶，承接索氏萃取管，称取土壤样品10g或废弃物样品3g置入玻璃纤维滤筒移入索氏萃取装置中，添加内标准品20μL，以300mL甲苯进行索氏萃取，调整热源使每小时至少回流四次，萃取时间须大于20小时，萃取完毕后冷却至室温，若发现有细微颗粒，应另以玻璃纤维滤纸，适量甲苯淋洗过滤至后收集合并于萃液中；

（7）方法空白样品以石英砂为空白基质，伴随样品一起分析；

（8）QCS以石英砂为空白基质，添加PAR，伴随样品一起分析；

所述水体样品分析方法，包括以下步骤：

（1）取20g水样经GF/D滤纸过滤，以110±5℃烘4小时后，移入干燥箱内冷却，计算其固体含量；

（2）若固体含量小于1%时，取1L水样转移至2L的分液漏斗中，以少量试剂水润洗定瓶量，并入分液漏斗中，加入内标准品20µL,10pg/µL，准备分液漏斗液相萃取；固体含量大于1%时，取相当于10克之固体样品即可，固体物颗粒应干燥并磨碎过筛<1mm，再移入索氏萃取，水层部分可忽略不计；

（3）以60mL的二氯甲烷加入原样品的定瓶量中，充分润洗并转移至分液漏斗中，进行第一次震荡萃取，静置分层，下层为二氯甲烷；

（4）干净漏斗中置入折成锥状的玻璃纤维滤纸，滤纸内盛装2-3匙无水硫酸钠，将下层二氯甲烷有机层流过无水硫酸钠藉以除去水份，收集于500mL烧瓶中；

（5）再以60mL二氯甲烷萃取分液漏斗中的样品两次，待分层后以相同方式除水，并入同一烧瓶中，减压浓缩至近干；

（6）以50mLHexane转移烧瓶中的样品至分液漏斗中，加入Hexane洗净水50mL，震荡数次，分层后排出下层水，再重复上述洗净步骤一次，收集Hexane层，减压浓缩至近干，准备试管酸洗；

（7）空白样品以试剂水伴随样品一起分析；

（8）QCS以试剂水添加PAR，伴随样品一起分析。