[发明专利]重组核酸片段RecCR010374及其检测引物与应用

权利要求书

1.具稻瘟病抗性的水稻植株的选育方法，其特征在于，步骤如下：

1)以‘中种恢629’为轮回亲本，‘华130B’为供体亲本进行杂交，将轮回亲本与供体植物进行杂交，将所得到的杂交种与轮回亲本进行回交，获得回交一代，利用正向选择标记PiC11ID17和负向选择标记PiC11S122、PiC11S166对其进行抗稻瘟病基因组片段的单侧同源重组片段筛选，并利用水稻全基因组育种芯片对其进行背景选择；

2)选择背景回复值超过75％的重组单株与轮回亲本再次进行回交，获得回交二代，利用正向选择标记PiC11ID17对其进行检测，选择含有抗稻瘟病基因组片段的重组单株，然后利用水稻全基因组育种芯片对其进行背景选择；

3)选择背景回复值超过87.5％的重组单株与轮回亲本又一次进行回交，获得回交三代，利用正向选择标记PiC11ID17和负向标记PiC11S122、PiC11S166对其进行抗稻瘟病基因组片段的另一侧同源重组片段筛选，并利用水稻全基因组育种芯片对其进行背景选择；

4)选择导入片段小，且背景回复值超过93.75％的重组单株，将选中的重组单株自交一次，获得自交种，利用正向选择标记PiC11ID17对其进行检测，并利用水稻全基因组育种芯片对其进行背景选择，最终获得含抗稻瘟病基因组重组核酸片段纯合且背景回复值超过99％的水稻植株；

扩增标记PiC11ID17的引物对为：

正向引物：5’-GTACTGGAGGATCAGGACTGG-3’，

反向引物：5’-CTGTTGCCTTGTGACTGTGAG-3’；

扩增标记PiC11S122的引物对为：

正向引物：5’-TACGACCGTGACATGTCCTT-3’，

反向引物：5’-ATTAACCACCATGCTCACCA-3’；以及

扩增标记PiC11S166的引物对为：

正向引物：5’-TTAGCCCCTCTCTCTCTCCA-3’，

反向引物：5’-GCCAGATCTAGCAGAGGTGA-3’；

所述水稻全基因组育种芯片为RICE60K。