[发明专利]用于转基因大米M12品系特异性基因成分精准定量检测的引物探针、试剂盒及方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体而言，本发明涉及用于转基因大米M12品系特异性基因成分检测的寡核苷酸引物和荧光标记探针，包含所述引物探针的试剂盒，用于测定转基因大米M12品系特异性基因成分的数字PCR检测方法以及样品中转基因大米M12品系特异性基因成分的特异性寡核苷酸引物和探针在检测转基因大米M12品系特异性基因成分中的应用。

背景技术

随着转基因产品的大量研究及其在日常生活中的广泛应用，转基因产品对人类健康以及生存环境所带来的安全性问题已经引起世人的广泛关注及争论。因此，世界各国在积极研究转基因技术的同时，也对各种转基因食品的检测分析方法进行了大量研究。但由于转基因种类多，数量大，尤其是很多转基因食品经过深加工和各种条件处理保存后，转基因成分大量降解，检测难度加大。因此，需要根据科学技术的发展不断更新和发展各种转基因食品的检测技术，以加强转基因食品监督、监测和管理，减少其商品化可能带来的风险，同时保护公众健康、保护广大消费者知情权和选择权。

目前，世界各国出于经济、卫生、环保等各种目的纷纷对转基因生物及其产品加强管理和检测。包括中国在内的50个左右国家和地区相继颁布并实行了“转基因标识制度”，对转基因生物及其加工产品进行标识和管理。近年来，随着各国有关GMO（Genetically Modified organism）标签法的建立和不断完善，对食品中的GMO含量下限已有所规定。很多国家不但要求对转基因食品进行定性检测，还需要对食品中的GMO含量进行定量检测，以便标识,其标识的阈值一般在0.9%–5%之间。而建立转基因产品的检测技术标准尤其是精准定量检测技术是实施转基因产品标识的技术前提。因此，转基因成分的精准定量技术将随着全世界标识制度的完善和发展日趋重要。

数字PCR(digital polymerase chain reaction，dPCR)作为更精确和更灵敏的DNA定量检测新技术，实现了单分子DNA的绝对定量。dPCR是在普通数字PCR基础上建立起来的DNA绝对定量方法，解决了普通数字PCR所用的标准曲线对测量结果产生影响等问题，并可减少其带来的基体效应。dPCR具有测量独立性与无需任何校准物的特点。

我国转基因水稻研究处于国际领先水平，dPCR技术的出现为大米转基因成分定量检测开辟了新的途径，使得食品中大米转基因成分的定量分析与溯源成为可能。利用dPCR技术提升定量检测方法的准确性与实用价值将成为转基因精准定量检测技术发展的一个重要方向。

发明内容

本发明的一个目的在于，提供精准定量检测转基因大米M12品系特异性基因成分的特异性寡核苷酸引物和荧光标记探针。

本发明的另一个目的在于，提供精准定量测定转基因大米M12品系特异性基因成分的数字PCR检测试剂盒。

本发明的另一个目的在于，提供精准定量测定转基因大米M12品系特异性基因成分的数字PCR检测方法。

本发明的还一个目的在于，提供转基因大米M12品系特异性基因成分的特异性寡核苷酸引物和探针在精准定量检测食品中转基因大米M12品系特异性基因成分中的应用。

针对上述发明目的，本发明提供以下技术方案：