[发明专利]鸭疫里默氏杆菌新型培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌新型培养基及其制备方 法。

背景技术

鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer)引起的一种接触性传染 病，又称为鸭传染性浆膜炎，多见于1-8周龄的雏鸭，呈急性或慢性败血症，常引起雏鸭的 大批发病和死亡，给养鸭业带来巨大损失。

鸭疫里默氏杆菌为革兰氏阴性菌，对培养基要求较为苛刻，在普通琼脂培养基和麦康凯 培养基上不生长。目前能用于培养鸭疫里默氏杆菌的培养基主要有血琼脂培养基和胰蛋白胨 大豆肉汤(TrypticSoyBroth，TSB)培养基。血琼脂培养基价格较为昂贵，不适于用于大批 量分离组织病料，且不能用于液体培养。胰蛋白胨大豆肉汤可用于液体培养，但各成份及含 量不清楚，同样存在价格昂贵的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种鸭疫里默氏杆菌新型培养基及其制备方法，该培 养基廉价、高效，且能使鸭疫里默氏杆菌杆菌较好地生长。

本发明采取的技术方案如下：

1、鸭疫里默氏杆菌新型培养基，按培养基用水量1L计，加入的组分及各组分的用量为： 蛋白胨15.0～25.0g，氯化钠5.0～15.0g，磷酸氢二钾4.0～10.0g，磷酸二氢钾1.0～2.5g，葡萄糖 4～7g，谷氨酰胺0.1～0.2g，维生素B₁0.2～0.5μg，硝酸铁5～20mg；调节pH范围值为7.0-7.5。

优选的，配制培养基时，将培养基组分分为三组，A组为蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾 和磷酸二氢钾，B组为葡萄糖和谷氨酰胺，C组为硝酸铁，三组分别灭菌，并且A组在灭菌 前需要调节pH值；在培养基使用之前将三组混合。

优选的，还包含组分琼脂，琼脂的用量为用水重量的1.5％。

优选的，按用水量1L计，加入的组分及各组分的用量为：蛋白胨15g，氯化钠5g，磷酸 氢二钾4g，磷酸二氢钾1g，葡萄糖4g，谷氨酰胺0.1g，维生素B₁0.2μg，硝酸铁5mg；调节 pH范围值为7.2。

2、鸭疫里默氏杆菌新型培养基的制备方法，按培养基用水量1L计，包括如下步骤：

(1)将15.0～25.0g蛋白胨，5.0～15.0g氯化钠，4.0～10.0g磷酸氢二钾，1.0～2.5g磷酸二 氢钾溶于1L水中，调节好pH值后高压灭菌；

(2)将400.0～700.0g葡萄糖和10.0～20.0g谷氨酰胺溶于1L水中，滤器过滤除菌；

(3)将0.20～0.50mg维生素B₁溶于1L水中，滤器过滤除菌；

(4)将5.0～20.0g硝酸铁溶于1L水中，高压灭菌；

(5)培养基使用前，取步骤(2)溶液10mL、步骤(3)和步骤(4)溶液各1mL，加 入步骤(1)溶液中，混匀即可。

需要说明的是，培养基中各组分的用量均按水的使用量为1L计算，加入的葡萄糖和谷氨 酰胺溶液体积、维生素B₁溶液体积以及硝酸铁溶液体积不计算在内。

本发明的有益效果在于：本发明所述培养基价格低廉，配制方法简单，鸭疫里默氏杆菌 能够在该培养基中较好地生长，可用于鸭疫里默氏杆菌的分离培养，且分离效率相对较高。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图：

图1为本发明新型培养基与TSB培养基(购自Sigma)在相同条件下培养鸭疫里默氏杆 菌ATCC菌株的SDS-PAGE图，其中1号为新型培养基培养菌株，2号为TSB培养基培养菌 株，3号为蛋白marker。

图2为鸭疫里默氏杆菌ATCC菌株在新型液体培养基与TSB液体培养基(购自Sigma) 的生长曲线。

图3三种用于分离培养感染鸭疫里默氏杆菌CH-1株雏鸭心血的培养基的比较，A为血 琼脂培养基；B为TSB培养基(购自Sigma)；C为本发明新型培养基。

具体实施方式

下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通 常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1SDS-PAGE法比较TSB培养基与新型培养基的培养结果