[发明专利]一株猪流行性腹泻病毒变异弱毒株及应用

说明书

本发明属于动物病毒学与动物传染病技术领域，具体涉及一株猪流行性腹泻病毒变异弱毒株及应用。该弱毒株为猪流行性腹泻病毒AJ1102‑R株(保藏号CCTCC NO:V201433)，经细胞传代、蚀斑克隆和培育证明增殖性能稳定。该弱毒株的基因组序列出现下述突变：第96代在3’UTR的第71～72位发生序列突变，缺失了2个碱基TT；在位于S基因的第3805～3816位存在序列突变，添加了12个碱基GATGCTATTGTT。该弱毒株的免疫效力可以诱导免疫仔猪产生高水平的中和抗体和足够攻毒保护，可以作为疫苗株应用。

技术领域

本发明属于动物病毒学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种猪流行性腹泻病毒变异弱毒株及其应用。

背景技术

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的猪的一种高度接触性传染病，该病的主要特征是水样腹泻、呕吐和脱水。各种年龄的猪均易感，1～2周龄哺乳仔猪的发病率高达90％～100％，给养猪业带来了很大的经济损失。1971年，英国首先报道了PED的发生，比利时、德国、瑞士、日本等许多国家相继报道了该病的发生(Pensaert M B et al,A new coronavirus-like particles associated withdiarrhea in swine.Arch Virol,1978,58:243-247；Takahashi K et al,An outbreak ofswine diarrhea of a new type associated with coronavirus like particles injapan.Vet Sci,1983,45:829-832)。近年来，亚洲一些国家，如日本、韩国、泰国和我国也都多次报道PED的发生(Kweon C H et al,Rapid diagnosis of porcine epidemicdiarrhea virus infection by polymerase chain reaction.J Vet Med Sci,1997,59(3):231-232)。上世纪90年代后期，我国开始大面积地使用TGE和PED二联疫苗进行免疫，取得了很好的效果(童昆周等.猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究.中国兽医科技，1996，26(1)：3-4)。

同猪的其它病毒性传染病的防制一样，PED的防制也主要是免疫预防。近几年来，在PEDV灭活和弱毒疫苗在猪场广泛应用的同时，由PEDV引起的仔猪腹泻仍然不断发生。2010年底首先在我国华南，随后蔓延至全国的哺乳小猪“顽固性腹泻”疾病，具有流行范围广、发病地区多、发病率高和死亡率高等特点，该病主要导致哺乳小猪出现水样腹泻、呕吐等主要临床特征和肠道出血为主要病理特征，发病猪场哺乳小猪的发病率100％，死亡率在80％以上，尤其是5日龄内的仔猪，死亡率可达到100％，对我国养猪业造成了极大的危害和重大的经济损失，严重影响了农民增收和猪肉消费市场稳定及养猪业的生产安全。随后经过病毒全基因组测序证实，导致本次PED大爆发的病原为PEDV变异株，该变异株与经典株CV777相比，主要位于S基因的S1区域(l-2217nt)存在3个插入区域(162nt,170-180nt,413-415nt)和1个缺失区域(470-475nt)(Sun et al,Outbreak of porcine epidemicdiarrhea in suckling piglets,China.Emerging infectious diseases,2012,18:161-163)。因此，迫切需要研制PEDV变异株的疫苗来预防和控制该病的发生与流行。

发明内容

本发明的第一个目的在于针对现有技术中的上述问题，提供一株猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,简称PEDV)变异弱毒株，用该弱毒株制备的弱毒疫苗对猪流行性腹泻具有良好的保护效力。

本发明通过以下技术方案实施：