[发明专利]一种渔用浸泡疫苗免疫佐剂及鱼类浸泡免疫方法

说明书

技术领域

本发明属于水生生物疾病免疫防治领域，尤其涉及一种渔用浸泡疫苗免疫 佐剂及鱼类浸泡免疫方法。

背景技术

草鱼出血病是一种流行面广，发病快，发病率和死亡率高，危害性和防治 难度大的病毒性传染病。发病的主要表现是病鱼全身充血和出血，特别是肌肉、 肠和鳃充血、出血。一旦感染此病，若不及时加以治疗控制，即有可能导致全 池覆灭，造成不可估量的损失。病鱼体色发暗，微带红色。病症主要由有三种 类型：“红肌肉”型，撕开病鱼的皮肤或对准阳光或灯光透视鱼体，可见皮下肌 肉充血，有全身充血和点状充血；“红鳍红鳃盖”型，病鱼鳍基、鳍盖充血，常 伴有口腔充血；“肠炎”型，病鱼肠道充血，常伴随有松鳞、肌肉充血。

草鱼出血病毒是中国分离的第一种鱼类病毒，隶属呼肠孤病毒科，水生动 物呼肠孤病毒属，直径70～80nm，二十面体球形颗粒，含有11个片段的双链 RNA。不同地区存在不同的毒株。目前已报道了10个分离株，该病毒主要引起 中国淡水养殖主要品种草鱼在鱼种阶段发生出血病，死亡率高达90％以上，给 水产养殖业造成巨大损失。该病毒寄生在鱼体组织细胞中，具有很强的抗药性， 所以难用药物治疗。

目前，草鱼出血病的预防方法已普遍采用疫苗免疫的方法，包括注射用疫 苗、浸泡疫苗及口服疫苗等。国内的鱼用疫苗产品制剂种类不多，在鱼类疫苗 研究方面多侧重于注射用疫苗。注射疫苗对草鱼出血病防治效果明显，但注射 免疫工作量大、工作效率低，且会对鱼体造成伤害；而在浸泡免疫过程中，抗 原需要克服鱼类体表黏液、鳞片及皮肤的障碍，才能进入机体，免疫效果差。 针对浸泡免疫效果差等问题，国内已开发的鱼类浸泡疫苗佐剂有莨菪碱、葡聚 糖、IMS1312、脂肪醇聚氧乙烯醚、皂角苷等，试验证实，其使用后均有一定 效果。

基于上述现状，提供新型浸泡疫苗佐剂，进一步改善鱼类疫苗浸泡方法， 提高鱼类疫苗免疫效果，是水产养殖快速发展所必须的。

发明内容

本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种渔用浸泡疫苗免疫佐剂及鱼 类浸泡免疫方法。其能够增加疫苗在鱼类角质层中的溶解度，提高疫苗对皮肤 的渗透性，刺激鱼类免疫反应，从而显著提高疫苗免疫效果，且使用方法简单， 成本低，对鱼类安全。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种渔用浸泡疫苗免疫佐剂， 包括水，还包括以下组分及其浓度：薄荷醇1-10μg/mL、左旋咪唑0.5-5μg/mL、 乙醇酸0.04-0.08mg/mL以及甘油0.01-0.02mg/mL。

优选地，包括水，还包括以下组分及其浓度：薄荷醇3-8μg/mL、左旋咪唑 2-4μg/mL、乙醇酸0.04-0.06mg/mL以及甘油0.01-0.02mg/mL。

优选地，包括水，还包括以下组分及其浓度：薄荷醇3μg/mL、左旋咪唑2 μg/mL、乙醇酸0.04mg/mL以及甘油0.01mg/mL。

优选地，包括水，还包括以下组分及其浓度：薄荷醇5μg/mL、左旋咪唑3 μg/mL、乙醇酸0.05mg/mL以及甘油0.01mg/mL。

优选地，包括水，还包括以下组分及其浓度：薄荷醇8μg/mL、左旋咪唑4 μg/mL、乙醇酸0.06mg/mL以及甘油0.02mg/mL。

优选地，所述佐剂还包括β-1，6葡聚糖1-3μg/mL。

优选地，所述佐剂还包括β-1，6葡聚糖2μg/mL。

本发明还提供了一种鱼类浸泡免疫方法，包括以下步骤：

A)取上述佐剂，将待免疫鱼类放入上述佐剂中浸泡15-30min后捞起，用 水清洗1-3min；

B)取上述佐剂与疫苗溶液按照1∶100-150的体积比混合均匀，得浸泡免疫 溶液；将经上述步骤A)处理后的待免疫鱼类放入上述浸泡免疫溶液中充气浸 泡30-60min，即完成免疫。

优选地，所述步骤B)中佐剂与疫苗溶液按照1∶110体积比混合均匀。

与现有技术相比，本发明具有如下技术优势：

本发明佐剂可提高鱼体表面的通透性，增加鱼体对疫苗的吸收效率，显著 提高进入鱼体内的疫苗量；经佐剂和疫苗的混合液处理后，能有效刺激鱼类的 免疫反应，从而提高疫苗的免疫效果。其使用方法简单，成本低，对鱼类安全， 有利于大规模生产。

具体实施方式