[发明专利]用于确认人体是否暴露于乙苯的微RNA及利用其的暴露确认方法

说明书

本发明涉及用于确认人体是否暴露于乙苯(Ethylbenzene)的微RNA及利用其确认人体是否暴露于乙苯的方法，具体而言，把表达因乙苯而特异性增加或减少的微RNA用作生物标记，可以有用地用于在暴露于环境中的人体试料中监视及判定乙苯的污染，可以用作查明因乙苯而诱发的毒性作用机理的工具。

技术领域

本发明涉及用于确认人体是否暴露于乙苯的微RNA及利用其的确认方法，更详细而言，涉及一种因暴露于乙苯而特异性地发生表达变化的微RNA及利用其的确认人体是否暴露于乙苯的方法。

背景技术

最近，作为与遗传基因表达调节相关的调节性RNA的重要类别，微RNA(miR,miRNA，小分子核糖核酸)日益抬头。这些小型(典型的是18-24个核苷酸长度)非编码RNA分子通过促进RNA分解、抑制mRNA翻译及对遗传基因转录的影响而能够调节蛋白质表达模式。微RNA调节发育及分化、细胞增殖控制、应激反应等多样的生物学过程。现在已知约1000个以上人类微RNA。

微RNA借助于RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III；参照Qi,P.etal.Cell.Mol.Immunol.3,411-419,2006)而转录，各个微RNA遗传基因、蛋白质编码遗传基因的基因内区也可以从主要对多个密切相关的微RNA进行编码的多顺反子转录物进行介导。基于RNA pol II或pol III的miRNA遗传基因的转录，一般生产数千碱基长度的称为原始miRNA转录物(pri-miRNAs)的最初转录物。在核中，pri-miRNAs借助于RNAse、Drosha而加工，生产70-至100-核苷酸发夹-状前体(pre-miRNAs)。运输到细胞质后，发夹pre-miRNA为了生产双链miRNA而被DICER追加进行加工。熟化的miRNA链混合于RNA-介导沉默复合体(RISC)内，其中，熟化的miRNA借助于碱基对互补性而与其标的mRNAs结合。miRNA碱基对与mRNA标的完美一致的比较罕见情形，其促进mRNA分解。进一步一般而言，miRNAs形成与标的mRNAs不完全一致的异型双链，对mRNA翻译产生影响。

微RNA机制对癌发病、细胞老化、脏器的成长等产生重要影响，因此，微RNA相关研究不仅在查明癌发病、老化等生命现象与人的关系方面发挥中心作用，而且，预计今后还将能够应用于发生及分化或基于干细胞的细胞治疗剂开发等研究，奠定韩国生物研究的核心领域地位。因此，微RNA标记的发掘将对预测包括癌在内的疾病的早期诊断可能性带来很多帮助，从这一点而言具有意义。

而且，微RNA标记被认为在特定环境有害物质的暴露预测方面也可以有用地使用。截止目前，主要进行因暴露于环境有害物质而导致的遗传基因(mRNA)变化形态及与因此导致的疾病的关联性相关研究，但最近，随着对与微RNA的关联性的关注日益增加，在一些研究中，观察了因暴露于诸如benzene(苯)、arsenic(砷)或RDX的有害物质而导致的微RNA的表达变化，把特异性地表达发生变化的微RNA及其标的遗传基因，作为对有害物质的标记而提出(Baccarelli,参照A.Bollati,V.Curr.Opin.Prediatr.21,243-251,2009)。另外，发掘的微RNA不仅作为用于暴露预测的标记，而且作为调节标的遗传基因的表达的调节者，也可以作为用于环境有害物质的毒性机理预测的标记而有用地使用。尽管可以说微RNA标记在环境有害物质暴露及毒性机理预测中的作用非常重要，但目前微RNA相关研究主要局限于疾病诊断用标记发掘，对在多样环境中暴露可能性很大的诸如挥发性有机化合物类的有害物质暴露导致的微RNA表达变化的研究不足。另外，后成遗传学变化与诸如遗传基因表达的遗传学变化的多样性相比，其程度不严重，因此，与需要多种标记的遗传基因表达性能分析相比，具有利用诸如一个微RNA或DNA甲基化的后成(epigenetic)标记，便可以早期诊断疾病或有害物质暴露的优点，而且具有能够以非侵入式方法进行诊断的优点。各微RNA调节多样的标的遗传基因，在高等真核生物中存在千余个微RNA，因而预计，可借助于微RNA进行调节的潜在机会巨大。