[发明专利]果斑病菌单抗及其杂交瘤细胞株

说明书

本发明涉及一种抗瓜类细菌性果斑病菌的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株。所述单克隆抗体由保藏号为CGMCC NO.10413的杂交瘤细胞株分泌产生，所述杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCC NO.10413。本发明的果斑病菌单抗可用于检测果斑病菌。

技术领域

本发明属于生物工程领域，尤其涉及一种瓜类细菌性果斑病菌，具体来说是一种瓜类细菌性果斑病菌单抗及其杂交瘤细胞株。

背景技术

瓜类果斑病是一种严重的细菌性病害，20世纪80年代后期该病因在美国数个州的西瓜上出现破坏性爆发而受到广泛关注，自此，瓜类细菌性果斑病在世界范围内传播开来。其病原为革兰氏阴性菌的嗜酸菌属燕麦种西瓜亚种(Acidovorax avenaesubsp.citrulli,Aac)，是一种具有高度破坏性的种传病菌。到目前为止，并无可以完全抵抗该病菌的商业化的培育品种。

瓜类果斑病菌又称果斑病菌，它可以引起西瓜、甜瓜、南瓜等葫芦科植物患病，据报道，在番茄、茄子等茄科植物的种子中也检测到了该病原菌，它可侵染果实、植株及种子，主要依靠带菌种子传播。带菌种子播种后会使幼苗患病，出现褐色坏死斑。带菌果实在采后贮藏运输过程中会感染健康果实，表面会出现水渍状斑点，最终导致整个果实腐烂，严重影响瓜类产量。

目前市场上用于检测果斑病菌的试纸是来自美国Agdia公司，国内报道较少，且现有技术中的免疫胶体金试纸条所使用的抗体往往是使用单克隆抗体作为金标抗体和多克隆抗体作为检测抗体配合使用，因此存在着检测精度低和交叉反应高、试纸条有效期短等问题，对检测的精度和准确度造成了一些影响。

发明内容

针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种瓜类细菌性果斑病菌免疫胶体金快速检测试纸条，所述的这种瓜类细菌性果斑病菌免疫胶体金快速检测试纸条解决了现有技术中的试纸条检测瓜类细菌性果斑病菌灵敏度不高的技术问题。

本发明提供了一种瓜类细菌性果斑病菌免疫胶体金快速检测试纸条，包括样品垫、紧密连接于所述样品垫的金标垫、所述的金标垫上与所述金标垫紧密连接的纤维素膜和紧密连接于所述纤维素膜另一端的吸水垫，所述的纤维素膜上远离金标垫的一端设置质控线，在质控线和金标垫之间的纤维素膜上设置检测线，其中，在所述的金标垫上设置有与胶体金耦联的单克隆抗体，所述的单克隆抗体由保藏号为CGMCC NO.10413的杂交瘤细胞株分泌产生，所述的检测线由单克隆抗体构成，所述的单克隆抗体由保藏号为CGMCCNO.10413的杂交瘤细胞株分泌产生。

进一步的，所述的质控线由羊抗鼠抗体组成。

进一步的，在所述的胶体金耦联的单克隆抗体中，单克隆抗体与胶体金在质量体积比为24μg:1mL。

进一步的，所述的试纸条背面可设置一个起支撑作用的背板。

进一步的，所述的试纸条装入一个盒体中，所述的盒体对应于样品垫的部位设有检测孔，对应于检测线和质控线的部位设有观测窗。

本发明还提供了一种单克隆抗体，由保藏号为CGMCC NO.10413的杂交瘤细胞株分泌产生。

本发明还提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏号为CGMCC NO.10413。

本发明的一种杂交瘤细胞株，分类命名：抗瓜类细菌性果斑病菌(Acidovoraxavenae subsp.citrullii)杂交瘤细胞株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)中，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院(中科院微生物研究所)，保藏日期为2015年3月19日，保藏号为CGMCCNO.10413。