[发明专利]血清外泌体miR‑9‑3p和miR‑124‑3p作为急性脑梗死的诊断标志物的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和医学领域，具体涉及一种血清外泌体miR-9-3p和miR-124-3p作为急性脑梗死的诊断标志物的应用。

背景技术

脑卒中是世界范围内发病率及死亡率较高的疾病之一，是导致成年人致残的首要因素。具备“五高”的特点，即高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率、高额诊治费用，给国家和患者家庭造成沉重的经济负担。缺血性卒中(Ischemic stroke，IS)占全部脑卒中的80％[Donnan GA,Fisher M,Macleod M,et al.Stroke[J].Lancet,2008,371(9624):1612-1623.]，采用组织型纤维蛋白溶酶原活化剂(t-PA)的溶栓治疗，以使闭塞的血管再通以挽救缺血半暗带是目前最为有效的治疗手段，但这受限于狭窄的溶栓时间窗，通常急性脑梗死的静脉溶栓时间在4.5h，这也成为当前溶栓治疗的瓶颈，因此，早期诊断已成为脑梗死成功治疗的关键。核磁共振是目前临床诊断最为有效的方法，但该方法也存在一些问题，比如影像学的检查通常是滞后的，早期急性脑梗死患者的核磁共振检查无明显改变，这都会影响到临床的决策和治疗。此外，由于该设备的费用问题影响了其普及性，并且检查的时间延误也严重影响着患者治疗。因此找寻诊断脑缺血损伤早期诊断的标志物是临床卒中研究的重要课题。已有研究发现了多种可以用于脑梗死诊断的蛋白标志物，如S-100β[Dassan P,Keir G,Brown MM.Criteria for a clinically informative serum biomarker in acute ischaemic stroke:a review of S100β[J].Cerebrovasc Dis,2009,27(3):295-302.]和NSE[Anand N,Stead LG.Neuron-specific enolase as a marker for acute ischemic stroke:a systematic review[J].Cerebrovasc Dis,2005,20(4):213-219.]，但它们并非脑损伤特异性蛋白，一些其他疾病如黑素瘤或组织损伤也会使其表达增加，因而这些蛋白质并不是理想的标志物。

MicroRNA是一种内源性的22个核苷酸的小分子单链RNA，通过靶向mRNA的3`UTR降解mRNA，或抑制其翻译从而实现对基因表达的调节[Wevers KP,Kruijff S,Speijers MJ,et al.S-100B:a stronger prognostic biomarker than LDH in stage IIIB-C melanoma[J].Ann Surg Oncol,2013,20(8):2772-2779.]。血液中也存在着microRNAs，它们具有较高的稳定性和一定的组织特异性，是临床诊断标志物的理想选择[Bartel DP.MicroRNAs:genomics,biogenesis,mechanism,andfunction[J].Cell,2004,116(2):281-297.]。最近研究发现，急性脑梗死患者或脑缺血损伤动物模型血液中的microRNA表达显著变化，如脑缺血和动脉粥样硬化患者血清中let-7e[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]、miR-21[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]和miR-145[Peng G,Yuan Y,Wu S,et al.MicroRNA let-7e Is a Potential Circulating Biomarker of Acute Stage Ischemic Stroke[J].Transl Stroke Res,2015,6(6):437-445.]的水平增高，而mirR-221[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]和miR-210[Tsai PC,Liao YC,Wang YS,et al.Serum microRNA-21 and microRNA-221 as potential biomarkers for cerebrovascular disease[J].J Vasc Res,2013,50(4):346-354.]则显著降低，因此认为它们可以作为脑梗死早期诊断的血液标志物。但它们同样缺乏组织特异性，miR-145是主要分布在血管平滑肌细胞[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]而miRNA-210则是氧敏感性microRNA[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]。