[发明专利]火麻仁中提取β‑谷甾醇和β‑胡萝卜苷的方法、应用及产品

说明书

技术领域

本发明涉及药物提取领域，具体涉及一种火麻仁中提取β-谷甾醇和β-胡萝卜苷的方法及应用和产品。

背景技术

根据最新统计数据，全世界60岁及以上老龄人口在2013年已经达到了8.14亿，预计到2050年这个数字将会超过20亿。世界已进入老龄化社会，随之而来的与衰老相关的疾病成为日益凸显的问题。包括阿尔茨海默病在内的神经退行性疾病是世界性的公共卫生难题之一。仅在中国，阿尔茨海默病的患者数量在2010年已增加至569万。在医药学领域，寻找防治老年性疾病的药物已经成为当务之急。

经过对衰老机制的长期研究，本领域内已形成多种衰老学说，包括程序衰老说、体细胞突变说、错误成灾说，自由基说、神经内分泌说、免疫衰老说、细胞之学说，等等。由此可见，衰老是一个十分复杂的过程，即便是同一类抗衰老药物，其发挥药效的方式也不尽相同，彼此之间无必然联系。

火麻仁是桑科植物大麻的种子，其作为一种食物具有悠久的历史。我国广西的巴马村是国际自然医药协会认定的“长寿村”，2004年的一份数据显示巴马村有74位健康的百岁老人。在巴马村当地，火麻仁汤被称作“长寿汤”，火麻仁的营养价值和诸如增强免疫力、降血压、通便等保健功能已经被许多研究人员报道过，但长期以来火麻仁的抗衰老活性一直被人们忽视。因此，寻找火麻仁中潜在的抗衰老活性化合物对于解开巴马村“长寿汤”之谜是十分必要的，更重要的是可以将火麻仁推广为世界性的抗衰老保健食品。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种火麻仁中提取β-谷甾醇和β-胡萝卜苷的方法及应用和产品。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种火麻仁中提取β-谷甾醇和β-胡萝卜苷的方法，其中，包括如下步骤：

1)将火麻仁研磨成粉末，置于甲醇中浸提，得浸提物；

2)用乙酸乙酯和水对浸提物进行萃取，分别得到水层和酯层的粗提物；

3)分别对水层和酯层的粗提物进行分离纯化，即得β-谷甾醇和β-胡萝卜苷。

上述技术方案中提供了一种新型的提取方法，从火麻仁中提取β-谷甾醇和β-胡萝卜苷，该方法简单易行，收率高。

作为优选，所述的步骤1)中浸提时间为5～10天。由于甲醇的破壁效果较好，提取效率较高，将火麻仁粉末置于甲醇中5～10天，能够得到合适的浸提物，以提高后续β-谷甾醇和β-胡萝卜苷的产率。

作为优选，所述的步骤2)中乙酸乙酯和水的体积比为1:1～3。

作为优选，所述的步骤3)中对酯层的粗提物分离纯化包括以下步骤：a1)以正己烷与乙酸乙酯溶剂系统作洗脱剂，对酯层的粗提物进行分离，获得目标组分；a2)将目标组分在乙酸乙酯中重结晶纯化，得到β-谷甾醇。作为进一步优选，所述的步骤a1)中采用硅胶开口柱对酯层的粗提物进行分离。

作为优选，所述的步骤a1)中将正己烷与乙酸乙酯溶剂系统按体积比95:5、90:10、85:15、80:20、70:30依次洗脱，获得目标馏分。

作为优选，所述的步骤3)中对水层的粗提物分离纯化包括以下步骤：b1)将水层的粗提物以甲醇与水溶剂系统作洗脱剂进行第一次分离，获得目标馏分；b2)以氯仿与甲醇溶剂系统作洗脱剂，对目标馏分进行第二次分离，得到β-胡萝卜苷。作为进一步优选，所述的步骤b1)中采用十八烷基键合硅胶开口柱进行第一次分离，所述的步骤b2)中采用硅胶开口柱对目标馏分进行第二次分离。

作为优选，所述的步骤b1)中将甲醇与水溶剂系统按照体积比50:50，60:40，70:30，80:20，100:0依次洗脱，取体积比80:20洗脱的馏分，获得目标馏分。

作为优选，所述的步骤b2)中将氯仿与甲醇溶剂系统按照体积比95:5，90:10，80:20依次洗脱目标馏分，获得β-胡萝卜苷。

本发明提供一种上述的方法提取的β-谷甾醇和β-胡萝卜苷在制备抗衰老药物中的应用。

研究发现，这两种活性化合物在抗衰老化合物的体外筛选模型中，可以显著延长酵母细胞的复制性寿命。为了研究作用机制，我们采用变异酵母菌株进行了抗衰老机理研究，发现这两种化合物是通过调节UTH1基因、SOD基因的表达，提高抗氧化能力，从而实现酵母细胞复制性寿命的延长的。

根据氧化自由基学说，氧化压力是导致衰老的主要原因。UTH1是一个与氧化应激相关的基因。UTH1敲除后的酵母不仅能显著延长其在营养缺乏时的寿命，还能增强其对过氧化物的耐受性。本发明发现，β-谷甾醇和β-胡萝卜苷的抗衰老活性与基因UTH1相关。