[发明专利]黄热病毒特异性检测抗原及其应用

说明书

本发明公开了一种黄热病毒特异性检测抗原及其应用。本发明所提供的黄热病毒特异性检测抗原为如下任一所示多肽：(a1)序列1；(a2)序列1的第166‑320位所示的多肽；(a3)将以上任一限定的多肽的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能相同的多肽。本发明所提供的黄热病毒特异性检测抗原在检测黄热病毒血清感染中具有较高的特异性和灵敏度；且与现有方法相比，抗原制备方法简单，且不存在操作者被感染病毒的风险。

技术领域

本发明属于病毒检测领域，涉及一种黄热病毒特异性检测抗原及其应用。

背景技术

黄热病毒是黄热病的病原体，通过蚊虫的叮咬传播，该病主要发生于非洲和南美洲。症状主要是发热、头痛，严重病例可发展为高热、结膜充血、呕吐等，皮肤及脏器可见出血及瘀斑，可发展为脑膜炎，重症者死亡率达20％-50％。

黄热病毒感染的检测主要依靠核酸及血清学方法。血清学方法主要检测黄热病毒的特异性抗体，不仅可用于病原监测，还可用于监测机体的免疫反应过程，以及评价疫苗的接种效果。目前所用的黄热病毒感染的血清学检测方法，主要还是利用全病毒作为检测抗原的免疫荧光法，将体外培养的黄热病毒固定在玻片上，与样本血清共同孵育后，加入荧光素标记抗体，通过显微镜下观察荧光强弱进行阴阳性判断。该方法以天然病毒作为检测抗原，结果较为准确，但抗原片制备过程复杂，在抗原制备过程中还存在操作者被感染的风险。

目前，急需一种检测结果准确、灵敏度高、特异性强的多肽抗原作为用于黄热感染的血清学检测抗原，因为多肽抗原制备过程简单，易于黄热血清检测试剂盒的大量制备，且不存在操作者被感染的风险。

发明内容

本发明的目的是提供一种黄热病毒特异性检测抗原及其应用。

本发明所提供的黄热病毒特异性检测抗原具体可为如下任一所示多肽：

(a1)氨基酸序列如序列表中序列1的第166-320位所示的多肽；

(a2)氨基酸序列如序列表中序列1所示的多肽；

(a3)将(a1)或(a2)限定的多肽的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能相同的多肽。

其中，(a2)所示多肽为分别在(a1)所示多肽上连接了含有6个His标签的片段后形成的多肽。当然，为了便于上述(a1)、(a3)和(a5)所示多肽的纯化，也可在其N端或C端连接上如下表所示的标签。

表：标签的序列

编码所述多肽的核酸分子也属于本发明的保护范围。

所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA、hnRNA或tRNA等。

在本发明的一个实施例中，所述核酸分子具体为编码所述蛋白质的基因，所述基因是如下任一所述的DNA分子：

(b1)编码序列如序列表中序列4的第496-960位所示的DNA分子；

(b2)编码序列如序列表中序列4所示的DNA分子；

(b3)在严格条件下与(b1)或(b2)限定的DNA分子杂交且编码所述多肽的DNA分子；

(b4)与(b1)-(b3)中任一限定的DNA分子具有90％以上同源性且编码所述多肽的DNA分子。

含有上述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。

所述重组载体可为重组表达载体，也可为重组克隆载体。