[发明专利]PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用及试剂盒

说明书

本发明提供了一种特异性强、灵敏度高的结直肠癌基因诊断分子标志物——PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用，以及一种结直肠癌诊断试剂盒。本发明的有益效果主要体现在：本发明发现了一种结直肠癌新的分子标志物，提供了PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用，以及一种结直肠癌诊断试剂盒，与传统的检测手段相比，分子标志物的诊断更及时、更特异，从而提高结直肠癌患者的5年生存率，降低死亡率，应用前景广阔。

(一)技术领域

本发明涉及PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用，以及一种结直肠癌诊断试剂盒。

(二)背景技术

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一，在世界范围内，发病率居于恶性肿瘤第三位，死亡率居第四位，每年约有120万新发病例，严重威胁人类健康。结直肠癌在全球范围内具有明显的地域分布差异，其中亚洲发病率较高，尤其是中国，主要与年龄、家族史、不健康的饮食及生活习惯等危险因素有关。大部分结直肠癌患者确诊时已处于肿瘤进展期，失去了最佳的治疗时机，导致五年生存率不到20％，预后较差。因此，探索结直肠癌快速诊断的评估方法，提高诊疗水平，提高存活率，是当前研究的热点和难点。

目前临床上用于结直肠癌诊断的方法包括：光学检查和形态学检查，常规的检查方法主要有排泄物便潜血检查、排泄物免疫学检查、钡剂双重造影检查、弹性乙状结肠镜检查、结肠镜检查和CT结肠成像。但是，上述检测方法仍存在一定局限性，如便潜血检查分离过程繁琐，易受细菌、食物及肠道粘液等干扰；结肠镜检查对设备和检测人员技术的要求较高，误诊率较大。

随着结直肠癌的发病机制的研究越来越广泛，分子生物标记物在其中的重要性越来越明显。这些标记物已成为结直肠癌诊断和治疗的重要靶点。PCDH18基因定位于4q28.3，属于原钙黏蛋白超家族成员之一，原钙粘附蛋白(protocadherin)是钙粘蛋白超家族中一个最大的亚族。钙粘附蛋白家族(cadherin family)为钙离子依赖型粘附分子，均为单链跨膜糖蛋白，介导特定组织或器官同型细胞间粘附，对胚胎发育中细胞识别、迁移、通讯和组织分化及中枢神经系统中神经回路的形成具有重要作用。原钙粘附蛋白在神经元发育和突触形成中有重要的作用。原钙粘附蛋白18(protocadherinl 8，PCDH18)基因表达主要在小鼠的前脑、后脑脑室管膜区、嗅泡、大脑皮层、丘脑、及小脑中。有关原钙黏蛋白家族与疾病发生的关系是近年来大家关注的热点问题。目前已有多个原钙黏蛋白家族成员被证实在肝癌、宫颈癌、前列腺癌、食管癌等在内的人类多种肿瘤中存在差异性表达并通过激活下游信号通路调控肿瘤发生发展。

现有研究表明PCDH18可激活记忆T细胞，但并没有研究揭示其与结直肠癌发生发展的关系。

(三)发明内容

本发明目的在于提供一种特异性强、灵敏度高的结直肠癌基因诊断分子标志物——PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用，以及一种结直肠癌诊断试剂盒。

本发明采用的技术方案是：

PCDH18基因在制备结直肠癌诊断试剂盒中的应用。

PCDH18基因包括人PCDH18基因、前体、亚型以及人PCDH18基因的任何功能等同物的多核苷酸。PCDH18基因包括与目前国际公共核酸序列数据库GeneBank中PCDH18基因(NC_000004.12)DNA序列具有70％以上的同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。

PCDH18基因的编码序列包括以下任一种DNA分子：

(1)序列表中SEQ ID NO.1所示的DNA序列；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白质的DNA序列；

(3)与(1)或(2)限定的DNA序列具有70％、优选地，90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。