[发明专利]甘蓝型油菜BnMOT1基因和BnMOT2基因及制备方法和应用在审
申请号: | 201610307654.8 | 申请日: | 2016-05-10 |
公开(公告)号: | CN105755012A | 公开(公告)日: | 2016-07-13 |
发明(设计)人: | 孙学成;胡承孝;谭启玲;秦世玉 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C12N1/19;C12R1/865 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘蓝 油菜 bnmot1 基因 bnmot2 制备 方法 应用 | ||
1.一种甘蓝型油菜BnMOT1基因,其序列为SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。
2.一种甘蓝型油菜BnMOT2基因,其序列为SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。
3.权利要求1或2所述甘蓝型油菜BnMOT1基因和BnMOT2基因的制备方法,其步骤是:
A、提取甘蓝型油菜的基因组DNA:取甘蓝型油菜的幼嫩叶片,采用CTAB法提取基因组DNA;
B、设计BnMOT1基因和BnMOT2基因的扩增引物:以拟南芥AtMOT1和AtMOT2基因序列作为参考序列,搜索同源序列并设计引物,引物序列如下表所示;
C、扩增:PCR反应体系如下表所示,PCR反应程序为94℃预变性5min,95℃变性30s,退火温度见上表,退火30s,72℃延伸110s,共32个循环,72℃延伸10min;
D、回收及测序:1%浓度琼脂糖凝胶电泳后,切胶回收目的片段并测序。
4.权利要求1或2所述的BnMOT1基因和BnMOT2基因在制备具有吸收钼的功能的酵母细胞中的应用,所述的酵母为酿酒酵母。
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