[发明专利]十六元环大环内酯类化合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于农药技术领域，具体涉及一类具有杀虫活性的大环内酯类抗生素，及其制备方法。

背景技术

1967年，日本Sankyo公司从Streptomyces hygroscopicus subsp.aureolacrimosus的发酵液中发现米尔贝霉素，研究至今，已分离到米尔贝霉素20余种。在长期的研究中，通过对米尔贝霉素的多个组分进行化学结构修饰,形成了一系列的衍生物。目前商品化最多的是米尔贝霉素A3/A4、莫西克汀、米尔贝肟。该类药物在农牧业上对寄生虫类有较好的防治效果，且具有广谱杀虫活性，如螨类、蚜虫、黄褐天幕毛虫、肠道寄生虫及其他危害农业及畜牧业的寄生虫。其作用特点包括用量少,反应强烈且对人安全、无毒害，不污染环境,对天敌无害,也不易产生抗性。作为抗寄生虫药，米尔贝霉素作用机制是，其作为一种γ-氨基丁酸(GABA)的激动剂，进而引发突触前的GABA释放，影响Cl^-通道的通透性，进而阻断神经递质的传导，从而引起虫体神经肌肉麻痹至死。

冰城链霉菌Streptomyces bingchenggensis是本实验室从土壤中分离得到的米尔贝霉素产生菌。与其它米尔贝霉素产生菌Streptomyces hygroscopicus subsp.aureolacrimosus和Streptomyces griseochromogenes一样，冰城链霉菌Streptomyces bingchenggensis除了产生米尔贝霉素A3/A4外，还产生其它米尔贝霉素系列化合物及其它的次级代谢产物。通过对Streptomyces bingchenggensis进行常温常压等离子诱变，我们获得了一株米尔贝霉素A3/A4高产菌株Streptomyces bingchenggensis BC-120-4(Hai-Yan Wang,Ji Zhang,Yue-Jing Zhang,Bo Zhang,Chong-Xi Liu,Hai-Rong He,Xiang-Jing Wang,Wen-Sheng Xiang.Combined application of plasma mutagenesis and gene engineering leads to 5-oxomilbemycins A3/A4 as main components from Streptomyces bingchenggensis[J].Applied Microbiology and Biotechnology,2014,98:9703-9712)。因此，对该突变菌株发酵代谢产物的分离纯化可以发现新型、更高生物活性的米尔贝霉素结构类似物，为米尔贝霉素生物合成机制的研究提供新的视角，也为新型米尔贝霉素的药物开发提供丰富的实验材料。

发明内容

本发明主要涉及由冰城链霉菌突变菌株(Streptomyces bingchenggensis BC-120-4)得到的新的米尔贝霉素类化合物，及它们的制备方法和应用。

本发明的目的是提供一类具有强杀虫活性的十六元环大环内酯类化合物。

本发明的另一个目的是提供这类十六元环大环内酯类化合物的制备方法。

本发明中十六元环大环内酯类化合物的结构式为：

上述十六元环大环内酯类化合物的制备方法是将冰城链霉菌突变菌株经扩大培养后再分离纯化；其中所述扩大培养依次分为斜面培养、种子培养及最后的发酵三个步骤。

其中，所述的冰城链霉菌突变菌株为Streptomyces bingchenggensis BC-120。

所述的斜面培养为：斜面培养基组成：葡萄糖10-12g/L，麦芽糖3-4g/L，酵母抽提粉3-4g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5-0.6g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5-0.6g/L，NaCl 0.5-0.6g/L，KNO₃1.0-1.2g/L，琼脂粉20-25g/L，pH 7.0-7.2，用去离子水配制，灭菌，接菌后置于28℃培养箱中，培养8-9天，将培养得到的孢子用无菌水配置成10⁷-10⁸c.f.u.ml^-1的孢子悬液备用。