[发明专利]血清淀粉样蛋白A（SAA）测定试剂盒

说明书

技术领域

本发明属医学生物检测技术领域，具体涉及一种血清淀粉样蛋白A(SAA)测定试剂盒及其使用方法。

背景技术

血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A，SAA)是一种急性时限反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12 000。在急性时限反应中，经IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100-1000倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。血清淀粉样蛋白A与高密度脂蛋白(HDL)有关，它能在炎症期间调节高密度脂蛋白的代谢。血清淀粉样蛋白A一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白A(AA)原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。

与C反应蛋白(CRP)类似，血清淀粉样蛋白A的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症、评估其活性、监控其活动及治疗。但是，血清淀粉样蛋白A检测在诊断发生病毒感染、肾移植排斥反应的患者(特别是进行免疫抑制治疗的患者)以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比C反应蛋白更确凿。研究发现，在患炎性关节炎的案例中，血清淀粉样蛋白A与疾病活动性的关系最密切。同时检测C反应蛋白和血清淀粉样蛋白A能提高对感染的诊断灵敏度。对于淀粉样蛋白A淀粉样变性患者，以将血清淀粉样蛋白A水平回复至正常为宗旨的治疗，能改善病情。

目前已知检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒较少，方法也存在较大的缺陷，如测定灵敏度不足，操作繁琐，成本昂贵等，均不利于临床推广使用。

发明内容

本发明提供一种血清淀粉样蛋白A(SAA)测定试剂盒。

本发明还提供上述试剂盒的检测方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种血清淀粉样蛋白A(SAA)测定试剂盒，它包括：试剂1(缓冲液)、试剂2(反应液)、校准品及质控品。

上述血清淀粉样蛋白A(SAA)测定试剂盒，具体包括如下组分：

(1)试剂1：Tris 100mM，叠氮钠5g/L，PEG-6000 4g/L，PH值为8.1；

(2)试剂2：Tris 100mM，叠氮钠1g/L，辛基苯酚聚氧乙烯1g/L，尼泊金甲酯1g/L，抗人血清淀粉样蛋白A抗体胶乳颗粒1g/L，PH值为6.0；

(3)校准品：水平1含血清淀粉样蛋白A抗原6.25mg/L，叠氮钠5g/L，水平2含血清淀粉样蛋白A抗原12.5mg/L，叠氮钠5g/L，水平3含血清淀粉样蛋白A抗原25mg/L，叠氮钠5g/L，水平4含血清淀粉样蛋白A抗原50mg/L，叠氮钠5g/L；

(4)质控品：血清淀粉样蛋白A抗原10mg/L，叠氮钠5g/L。

所述的试剂1、试剂2、校准品及质控品的溶剂为电导率(25℃)不大于0.1mS/m的纯净水。

所述的抗人血清淀粉样蛋白A抗体为兔抗人多克隆抗体。

所述的胶乳颗粒为粒径为80-100nm。

所述的PH值调节试剂为1mM的盐酸溶液。

所述检测试剂盒用于定量测定血清中血清淀粉样蛋白A的含量。

本发明第二方面提供所述测定试剂盒的检测方法，包括如下步骤：

1)准备编号为1、2、3、4的4支反应管；

2)同时在第1反应管内加入试剂1 150μL，水平1校准品3μL混合均匀，在第2反应管内加入试剂1 150μL，水平2校准品3μL混合均匀，在第3反应管内加入试剂1 150μL，水平3校准品3μL混合均匀，在第4反应管内加入试剂1 150μL，水平4校准品3μL混合均匀，4支反应管均孵育5分钟；

3)5分钟孵育结束后，同时在第1反应管内加入试剂2 150μL混合均匀，在第2反应管内加入试剂2 150μL混合均匀，在第3反应管内加入试剂2 150μL混合均匀，在第4反应管内加入试剂2 150μL混合均匀，均孵育半分钟；

4)半分钟孵育结束后，分别读取1、2、3、4反应管吸光度A₁₁,A₁₂,A₁₃,A₁₄；

5)继续孵育5分钟后，再次分别读取1、2、3、4反应管吸光度A₂₁,A₂₂,A₂₃,A₂₄；