[发明专利]一种心肌功能检测用试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种心肌功能检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，所述试剂盒包括塑料板、设置在塑料板上的玻璃纤维素膜、设置在玻璃纤维素膜上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上一端设有样本垫，对应的另一端设有吸水垫，其特征在于，所述玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的混合物；所述硝酸纤维素膜上设置有检测线1、检测线2、检测线3和控制线，所述检测线1上包被有肌钙蛋白二抗，所述检测线2上包被有肌红蛋白二抗，所述检测线3上包被有肌酸激酶二抗，所述控制线上包被有羊抗鼠lgG；

其制备方法包括以下操作步骤：

1)原材料的制备：

A：制备玻璃纤维素膜：将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体、量子点标记的肌酸激酶抗体混合包被在玻璃纤维素膜上，干燥，备用；

B：制备硝酸纤维素膜：取硝酸纤维素膜，间隔划分出检测线1、检测线2、检测线3和控制线，然后将肌钙蛋白二抗、肌红蛋白二抗、肌酸激酶二抗、羊抗鼠lgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上，之后将包被后的硝酸纤维素膜放入封闭液中封闭，干燥，备用；

2)组装：在塑料板上放置步骤1)制备的玻璃纤维素膜，然后在步骤1)制备的玻璃纤维素膜上放置步骤1)制备的硝酸纤维素膜，然后在硝酸纤维素的一端放置样品垫，对应的另一端放置吸水垫，干燥，即完成；

步骤A中还包括首先制备量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的混合物，具体方法包括以下操作步骤：

a：在胶乳颗粒悬浊液中加入改性环糊精，混匀24小时，纯化，得改性环糊精-胶乳复合物悬浊液；

b：在步骤a制备的改性环糊精-胶乳复合物悬浊液中加入量子点，混匀24小时，纯化，得量子点-改性环糊精-胶乳复合物悬浊液；

c：在步骤b制备的量子点-改性环糊精-胶乳复合物悬浊液中加入活化剂，活化15分钟，纯化，之后加入肌钙蛋白抗体，混匀2～4小时后，离心得沉淀物颗粒，将沉淀物颗粒用封闭液重悬，室温混匀1小时，之后再进行纯化，即得量子点标记的肌钙蛋白抗体；

d：按照上述步骤a～c同样的方法制备量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体，然后将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体混合，备用。

2.如权利要求1所述的心肌功能检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，所述改性环糊精为羧甲基化改性环糊精或氨基化改性环糊精。

3.如权利要求1所述的心肌功能检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤a中所述改性环糊精与胶乳颗粒的质量比为20：1；步骤b中所述量子点与环糊精-乳胶复合物的质量比为10：1；步骤c中所述肌钙蛋白抗体与量子点-改性环糊精-胶乳复合物的质量比为1：20。

4.如权利要求1所述的心肌功能检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤A中将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体、量子点标记的肌酸激酶抗体混合包被在玻璃纤维素膜上的具体方法为：将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体混合物均匀喷涂于玻璃纤维素膜上。

5.如权利要求1所述的心肌功能检测用试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤B中将肌钙蛋白二抗、肌红蛋白二抗、肌酸激酶二抗、羊抗鼠lgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上的具体方法为：分别取浓度均为1mg/ml的肌钙蛋白二抗、肌红蛋白二抗、肌酸激酶二抗和羊抗鼠IgG，以1ul/cm，10cm/秒的速度分别喷涂到硝酸纤维的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上。

6.一种心肌功能检测用试剂盒，其特征在于，由如权利要求1～5任一项所述的制备方法制备而成。

7.如权利要求6所述的心肌功能检测用试剂盒，其特征在于，所述玻璃纤维上包被的量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的混合物中量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的质量比为1：1：1。

8.如权利要求6所述的心肌功能检测用试剂盒，其特征在于，所述量子点为硒化镉或硫化镉量子点。

9.如权利要求6任一项所述的心肌功能检测用试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上设置的检测线1与检测线2之间、检测线2与检测线3之间、检测线1与控制线之间的间隔均不小于5mm。