[发明专利]一种从发酵液中高效提取γ‑聚谷氨酸的工艺

权利要求书

1.一种从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)：将微生物发酵得到的γ-PGA发酵液通过孔径为1～50μm滤袋以及孔径为0.25～1μm的微孔过滤器过滤，或于高速离心机中离心分离，除去发酵液中大量的不溶性发酵残余营养物和菌体；

步骤(2)：在步骤(1)得到的发酵液中加入三氯乙酸调节pH值为3～5，去除发酵液中的杂蛋白；

步骤(3)：在步骤(2)发酵液中加入1～30g/L硅藻土吸附发酵液中的残余菌体，过滤或离心分离出不溶物，再加入0.5～20g/L活性炭吸附发酵液中的色素和其它杂质，经过滤或离心分离获取上清液；

步骤(4)：在步骤(3)处理后的发酵液中取样，即在步骤(3)中的上清液取样，测量及估算发酵液中γ-PGA的含量；

步骤(5)：根据步骤(4)测算的发酵液中γ-PGA的含量，加入γ-PGA的含量的1～5倍的CTAB，用NaOH溶液调节pH值为7～13，混合搅拌1～12h，使得CTAB与发酵液中γ-PGA充分反应，然后离心分离得到不溶性CTAB/γ-PGA复合物；

步骤(6)：将步骤(5)收集得到的CTAB/γ-PGA复合物置于NaCl溶液中，调节pH值为6～9，解离1～12h，得到含有γ-PGA的澄清溶液；

步骤(7)：于步骤(6)γ-PGA澄清溶液中加入γ-PGA澄清溶液体积的2～5倍的乙醇，在温度为4～10℃的条件下冷却静置12～24h，离心得沉淀物，然后将沉淀物冷冻干燥得到高纯度的γ-PGA白色结晶。

2.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(1)中的γ-PGA发酵液为通过微生物液体发酵获得的γ-PGA发酵液。

3.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(1)中的γ-PGA发酵液为在微生物固体发酵得到的含γ-PGA的固体基质中加入固体基质体积的8～12倍的蒸馏水进行搅拌浸提0.5～2h后，通过100目筛网过滤去渣获得的γ-PGA浸提液。

4.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(1)中的离心分离，转速为5000～15000rpm，离心时间为5～30min。

5.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(3)中的过滤是通过孔径为1-50μm的滤袋以及孔径为0.25-1μm的微孔过滤器过滤。

6.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(3)中的离心分离，转速为5000～15000rpm，离心时间为5～30min。

7.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(6)中的NaCl溶液的浓度为0.1～1.0mol/L。

8.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取的工艺，其特征在于：所述步骤(7)中的乙醇的浓度大于95％。

9.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取的工艺，其特征在于：所述步骤(7)中的冷冻干燥为在压强为10Pa～30Pa的高真空度下升华干燥至环境温度，1～5h后，在压强为15Pa～30Pa、温度低于40℃下，干燥4～10h。

10.根据权利要求1所述的从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺，其特征在于，所述步骤(7)中的γ-PGA白色结晶为Na-型γ-PGA和H-型γ-PGA的混合物。