[发明专利]一种石斑鱼Epinecidin-1多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种石斑鱼Epinecidin‑1多肽及其应用。本发明的石斑鱼Epinecidin‑1多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明的石斑鱼Epinecidin‑1多肽是一种具有抗细菌和抗病毒活性的抗菌肽，该石斑鱼Epinecidin‑1多肽具有抗鱼类病毒的特点，可以用于制备抗病毒药物，该石斑鱼Epinecidin‑1多肽的研究将对进一步研究和开发抗病功能基因制品具有重要的科学价值和应用价值。

技术领域：

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种石斑鱼Epinecidin-1多肽及其应用。

背景技术：

石斑鱼(Epinephelus coioides)是我国南方重要的海水养殖经济种类，价值极高。近年来，随着养殖规模的扩大，爆发性死亡现象常有发生，给水产养殖业造成重大的经济损失。病毒病是危害石斑鱼健康养殖的常见病原，主要包括石斑鱼虹彩病毒(Singaporegrouper iridovirus,SGIV)和神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)等。目前对鱼类病害的防治，传统方式采用抗生素和化学药物，造成了药物残留、耐药性及环境污染等严重问题。为此，开展鱼类免疫抗病的基础研究及研制新型抗病基因工程产品已经成为当务之急。

抗菌肽(Antimicrobial Peptide,AMP)是一类内源性的具有广谱抗菌活性的天然生物小分子肽，广泛存在于动物、植物和真菌中，参与多种生物学过程，具有多种生物学功能，如抗菌、抗病毒、抗凋亡等，应用潜力很大。目前石斑鱼中已经发现了多种抗菌肽，Epinecidin-1是其中的一种。石斑鱼Epinecidin-1是一个编码67个氨基酸的小肽，人工合成的Epinecidin-1具有抑制副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)、创伤弧菌(V.vulnificus)、巴氏德杆菌(Pasteurella multocida)、摩根菌(Morganellamorganii)、温和气单胞菌(Aeromonas sobrio)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)、脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)和大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α的作用，但是，在抗鱼类病毒方面的作用还未见报道。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供具有抗鱼类病毒活性的石斑鱼Epinecidin-1多肽。

本发明的石斑鱼Epinecidin-1多肽是通过以下方法获得的，将石斑鱼Epinecidin-1的氨基酸序列与其他物种的Epinecidin-1氨基酸序列同源对比后，确定石斑鱼Epinecidin-1的成熟肽区域，然后通过人工合成的方法获得石斑鱼Epinecidin-1多肽，其序列为：FIFHIIKGLFHAGKMIHGLV(如SEQ ID NO.3所示)。

本发明的第二个目的是提供编码上述的石斑鱼Epinecidin-1多肽的编码基因。

本发明还提供了石斑鱼Epinecidin-1，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还进一步提供了编码上述石斑鱼Epinecidin-1的编码基因，优选，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明通过实验发现，在石斑鱼Epinecidin-1多肽的浓度为50-800μg/mL时，作用96h后对GS细胞和GB细胞无明显细胞毒性，且能够有效抑制虹彩病毒(SGIV)和神经坏死病毒(NNV)复制，有望研发成为新的抗病毒药物。

本发明的第三个目的是提供石斑鱼Epinecidin-1多肽或上述石斑鱼Epinecidin-1在制备抗病毒药物中的应用。

优选，所述的抗病毒药物为抗虹彩病毒药物或抗神经坏死病毒药物。