[发明专利]香豆素羧酸紫草宁酯类衍生物及其合成方法和应用

说明书

本发明属于化学制药技术领域，具体涉及一类紫草宁衍生物及其在肿瘤抑制方面的应用。通过合成手段将相应香豆素羧酸与紫草宁连接，获得相应酯类衍生物，体外抗肿瘤的活性研究表明，这类香豆素羧酸紫草宁衍生物对肿瘤细胞株有很强的抑制活性。

一、技术领域

本发明属于化学制药技术领域，具体涉及一种香豆素羧酸紫草宁酯类衍生物的制备及其在肿瘤抑制方面的应用。

二、背景技术

紫草宁具有广谱活性，如抗菌、抗炎、抗肿瘤等。大量文献报道，它作为先导物在抑制肿瘤活性的功能分子研究方面有很大的潜力。如：Xuan等于2009年在《CancerLetters》第274期p233页发表的α-甲基-正丁酰紫草宁和β，β-二甲基丙烯酰紫草宁，Naturally-occurring shikonin analogues-A class of necrop-Totic inducers that circumventcancer drug resistance。文章表明，该紫草宁衍生物具有很好的抗肿瘤活性，能够抑制肿瘤细胞系HL60和K562，这说明该紫草宁酯在肿瘤抑制方面具有很好的活性。

本课题组在多年的研究过程中，获得了多系列紫草宁衍生物，并申请了相关专利：紫草宁含氟羧酸酯类衍生物及其合成方法和应用(申请号：201110412497.4)以及紫草宁肉桂酸酯类衍生物及其合成方法和应用(申请号：201210002020.3)，发现了若干具有高效肿瘤细胞抑制活性的功能分子。

由于紫草宁本身对正常组织、细胞具有毒副作用，因此对紫草宁进行结构修饰，提高抗癌活性，克服其缺点，获得高效低毒的衍生物成为主要的研究课题。

三、发明内容

本发明以紫草宁为起始原料，通过半合成获得一类新颖紫草宁羧酸酯类衍生物。抗肿瘤活性表明，该衍生物对肿瘤细胞株MCF-7人乳腺癌细胞、HeLa人宫颈癌细胞、MDA-MB-231人乳腺癌细胞、A549人肺癌细胞具有明显的抑制活性，其中在HeLa细胞活性结果中，化合物4活性最优，IC₅₀值达到6.25±0.352μM；在MCF-7细胞活性结果中，化合物4活性最优，IC₅₀值达到14.56±1.00μM；在MDA-MB-231细胞活性结果中，化合物4活性最优，IC₅₀值达到19.73±3.02μM；在A549细胞活性结果中，化合物4活性最优，IC₅₀值达到9.73±0.93μM。

本发明需要解决的问题是提供一类结构新颖的紫草宁羧酸酯类衍生物及其制备方法和在肿瘤抑制中的应用。

本发明的香豆素羧酸紫草宁酯类衍生物结构式如式I所示：

本发明的式I结构紫草宁羧酸酯类衍生物是通过紫草宁与相应羧酸半合成得到新颖的结构活性功能化合物。

本发明通过体外肿瘤细胞抑制活性证明紫草宁羧酸衍生物对MCF-7、HeLa、MDA-MB-231、A549具有明显的抑制活性，其中化合物4对HeLa的抑制活性最强，IC₅₀值达6.25±0.352μM，详见附图1、2、3、4。通过毒性实验证明了这一类新颖的化合物对人胚肾细胞(293T)毒副作用低，IC₅₀值都大于30μM，而紫草宁的毒性较大IC₅₀值为10.52μM，详见附图5。

本发明与现有技术相比较其有益效果：

在本发明中，所获香豆素羧酸紫草宁酯类衍生物与紫草宁相比，均具有明显的肿瘤细胞抑制活性，部分新颖化合物对肿瘤细胞株的抑制活性明显优于其母体分子紫草宁，并且毒副作用低。同时化合物4对HeLa细胞增殖的抑制最为明显，且能减弱其黏附性。本研究拟通过流式、线粒体膜电位变化、western blot及激光共聚焦手段对药物作用机制进行深入探究。

四：附图说明