[发明专利]一种动物皮脱细胞基质敷料的制备方法以及所得的敷料

权利要求书

1.一种动物皮脱细胞基质敷料的制备方法，将动物皮的断层皮片经过病毒灭活步骤、脱脂步骤、脱毛步骤以及脱细胞步骤制得，其特征在于，所述脱细胞步骤包括多次冻融步骤以及所述多次冻融步骤之后的脱细胞溶液脱细胞步骤，其中，所述冻融步骤中，冷冻温度为-70℃～-90℃，冷冻时间为5～15小时；所述脱细胞溶液脱细胞步骤中，所述脱细胞溶液包含质量浓度为0.01％～0.2％的胰酶、质量浓度为0.1％～1.0％的硫酸铵以及质量浓度为0.01％～0.2％的脱脂剂，所述断层皮片与所述脱细胞溶液的质量比为1:6～1:10。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述脱细胞溶液包含质量浓度为0.01％～0.09％的胰酶、质量浓度为0.5％～1.0％的硫酸铵以及质量浓度为0.05％～0.15％的脱脂剂；所述断层皮片浸泡于所述脱细胞溶液中10～60分钟。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述脱脂剂选自平平加、Triton X-100、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述多次冻融步骤于所述病毒灭活步骤之前进行，或穿插于所述病毒灭活步骤、脱脂步骤、脱毛步骤之间进行。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述病毒灭活步骤为将所述断层皮片置于病毒灭活溶液中浸泡10～60分钟，所述断层皮片与所述病毒灭活溶液的质量比为1:6～1:10，所述病毒灭活溶液包含质量浓度为0.01％～0.2％的过氧乙酸和质量浓度为0.1％～1.0％的氯化钠，优选地，所述病毒灭活溶液包含质量浓度为0.01％～0.07％的过氧乙酸和质量浓度为0.1％～0.5％的氯化钠。

6.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述脱脂步骤为将所述断层皮片置于脱脂溶液中10～60分钟，所述断层皮片与所述脱脂溶液的质量比为1:6～1:10，所述脱脂溶液包含质量浓度为 0.1％～1.0％的纯碱、质量浓度为0.1％～1.0％的烧碱以及质量浓度为0.01％～0.2％的脱脂剂，优选地，所述脱脂溶液包含质量浓度为0.1％～0.5％的纯碱、质量浓度为0.1％～0.7％的烧碱以及质量浓度为0.01％～0.07％的脱脂剂；其中，所述脱脂剂选自平平加、Triton X-100、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种。

7.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述脱毛步骤为将所述断层皮片置于质量浓度为1.5％～6.0％的Na₂S溶液中10～60分钟，所述断层皮片与所述脱脂溶液的质量比为1:6～1:10，优选地，所述Na₂S溶液的质量浓度为1.5％～3.0％。

8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，当所述断层皮片包含表皮层时，所述制备方法还包括去除表皮步骤，其为将所述断层皮片置于质量浓度为1.0％～5.0％的醋酸溶液中10～30分钟；优选地，所述去除表皮步骤在所述多次冻融步骤之后进行。

9.根据权利要求1-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括去除DNA/RNA步骤，其为将所述断层皮片置于DNA酶溶液和RNA酶溶液中浸泡20～60分钟。

10.根据权利要求1-9任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法在所述脱细胞步骤之后还包括冷冻干燥步骤以及灭菌步骤，其中，所述灭菌步骤采用剂量为15～30KGy/h的⁶⁰Co辐照灭菌。

11.一种动物皮脱细胞基质敷料，其特征在于，采用权利要求1-10任一项所述制备方法制得。