[发明专利]用于膀胱癌诊断的miRNA生物标志物及检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测，涉及用于人膀胱癌诊断的microRNA生物标志物及检测试剂 盒。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，也是全身十大常见肿瘤之一。占我国泌尿 生殖系统肿瘤发病率的第一位，而在西方其发病率仅次于前列腺癌，居第2位。2012年全国 肿瘤登记地区膀胱癌的发病率为6.61/10万，列恶性肿瘤发病率的第9位。膀胱癌可发生于 任何年龄，甚至于儿童。其发病率随年龄增长而增加，高发年龄50～70岁。随着我国老龄化 进程加速，膀胱癌发病率呈现逐年上升的趋势。国内大城市中如北京，上海，天津，膀胱癌的 发病率已位列男性常见恶性肿瘤的第六位，而死亡率位列第七位。

MicroRNA(miRNA)是最新发现的长约18-25个核苷酸的非编码小分子RNA，在进化 上高度保守，数量约占基因组的1％，现已普遍认为miRNA与人类疾病的发生有密切的联系， 其发现为人们在基因水平认识癌症提供了新思路。MiRNA在转录或转录后水平负调控蛋白 质编码基因的表达：通过与其靶基因mRNA非完全互补或近似完全互补结合，导致mRNA降解 或抑制其翻译。人类基因组约30％的基因受miRNA调控，在细胞的生长、增殖、分化和凋亡等 多方面发挥着重要的生物调节作用。研究已证实miRNA的异常调控与肿瘤形成及进展关系 密切。MiRNA的靶基因多数是参与转录、信号转导、肿瘤发生等生物学效应的基因。随着 miRNA与癌症关系的不断深入研究，发现miRNA并不只是参与了癌症形成的初期阶段，还涉 及到疾病病情变化、对药物的敏感性、患者预后等等多方面。随后基于miRNA的癌症基因治 疗顺势登上舞台，凸显出很大的研究价值。

迄今为止，尚未寻找到可靠的microRNA生物标志物用于诊断人膀胱癌。

发明内容

本发明的目的在于提供用于膀胱癌诊断的microRNA生物标志物及检测试剂盒。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

一组用于人膀胱癌诊断的microRNA生物标志物，包括：hsa-miR-384、hsa-miR- 126-5p、hsa-miR-424-5p、hsa-miR-19b-3p和hsa-miR-26a-5p；所述hsa-miR-384的核苷酸 序列如SEQIDNO.1所示；所述hsa-miR-126-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述 hsa-miR-424-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述hsa-miR-19b-3p的核苷酸序列如 SEQIDNO.4所示；所述hsa-miR-26a-5p的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。

进一步地，所述microRNA生物标志物为人血清microRNA生物标志物。

一组人膀胱癌诊断用microRNA引物、探针的组合，包括hsa-miR-384引物、探针； hsa-miR-126-5p引物、探针；hsa-miR-424-5p引物、探针；hsa-miR-19b-3p引物、探针；hsa- miR-26a-5p引物、探针；所述引物包括反转录引物、定量PCR前引物和定量PCR后引物；hsa- miR-384的反转录引物序列如SEQIDNO.6所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.7所示， 定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；hsa-miR-126-5p的反转录引物序列如SEQID NO.8所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.9所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所 示；hsa-miR-424-5p的反转录引物序列如SEQIDNO.10所示，定量PCR前引物序列如SEQID NO.11所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；hsa-miR-19b-3p的反转录引物序列 如SEQIDNO.12所示，定量PCR前引物序列如SEQIDNO.13所示，定量PCR后引物序列如SEQ IDNO.16所示；hsa-miR-26a-5p的反转录引物序列如SEQIDNO.14所示，定量PCR前引物序 列如SEQIDNO.15所示，定量PCR后引物序列如SEQIDNO.16所示；各microRNA探针的核苷 酸序列如SEQIDNO.17所示。

一种人膀胱癌的肿瘤诊断试剂盒，包括如上所述的microRNA引物、探针的组合。