[发明专利]黑蚁中大环内酯倍半萜骨架化合物的提取方法有效
申请号: | 201610346184.6 | 申请日: | 2016-05-24 |
公开(公告)号: | CN106008428B | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | 尹卫平;李海迪;高嘉屿;刘坤;刘华清 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C07D307/93 | 分类号: | C07D307/93;C07D491/06;A61P31/04 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙)41120 | 代理人: | 炊万庭 |
地址: | 471000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黑蚁中大环 内酯 倍半萜 骨架 化合物 提取 方法 | ||
1.黑蚁中大环内酯倍半萜骨架化合物的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、取黑蚁原材料,清洗干净后放入45-50℃烘箱中鼓风干燥至恒重,粉碎,得到黑蚁粉末,备用;
步骤二、将步骤一得到的黑蚁粉末用其重量5-10倍的二氯甲烷溶剂室温冷浸,48-50h后过滤,将黑蚁残渣滤出后再次加入黑蚁残渣重量5-10倍的二氯甲烷重复提取,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣经过干燥,得到黑蚁滤渣粉,备用;
步骤三、将步骤二得到的黑蚁滤渣粉放置通风处风干,加入质量百分比为60-80%的甲醇溶液室温冷浸提取48-50h后过滤,收集滤液,滤出的黑蚁渣粉再次加入质量百分比为60-80 %甲醇溶液室温冷浸提取,重复上述操作若干次,合并滤液,减压下除去溶剂后得到黑蚁60-80%甲醇浓缩液;然后将浓缩液置于-10-20℃冰箱中冷冻至结冰状,取出再放置于冷冻干燥仪中,调至-40℃下冷冻干燥处理,得到黑蚁的60-80%甲醇浸膏,甲醇浸膏密封后放置于-80℃冰箱中,备用;
步骤四、将步骤三得到的甲醇浸膏用甲醇溶剂充分溶解后,用硅胶拌样后,利用湿法上柱,进行柱色谱分离;取100-200目硅胶装入色谱柱中,上样,用7-10倍柱体积的乙酸乙酯洗脱,收集乙酸乙酯组分,合并浓缩后得到乙酸乙酯提取浸膏,备用;
取上述黑蚁的乙酸乙酯提取浸膏用乙酸乙酯溶剂充分溶解,加入硅胶充分拌样干燥,进行柱色谱分离,取200-300目硅胶装入色谱柱中,上样,然后分别用石油醚-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱,石油醚-乙酸乙酯洗脱液的梯度比例依次为10:1、8:2、6:4、4:6、2:8、1:10和0:10,分别收集组分,TLC检测合并相同组分,得到不同组分段共7个组分;
取梯度比例为8:2的石油醚-乙酸乙酯组分段,进一步通过Sephadex LH-20凝胶色谱进行纯化,收集合并组分,经过TLC分析,分别得到化合物1和化合物2,化合物1和化合物2的结构式如下:
化合物1
;
化合物2
。
2.如权利要求1所述黑蚁中大环内酯倍半萜骨架化合物的提取方法,其特征在于:梯度比例为8:2的石油醚-乙酸乙酯组分段进行Sephadex LH-20凝胶色谱纯化过程中,流动相采用摩尔比例为1:1的氯仿-甲醇溶液等度洗脱,流速为0.3mL/min。
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