[发明专利]一种用于BHK细胞的无血清培养基

权利要求书

1.一种用于乳仓鼠肾细胞BHK21的培养基，其特征在于，所述培养基包括葡萄糖、蛋白水解物、必需氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素、核酸类物质和活性添加剂，其中，

所述必需氨基酸为谷氨酰胺，含量为200-800 mg/L培养基，

丙氨酸 5-8mg/L，

精氨酸 100-200mg/L，

天冬酰胺 20-40mg/L，

天冬氨酸 10-30mg/L，

胱氨酸 30-50mg/L，

半胱氨酸 10-40mg/L，

谷氨酸 10-20mg/L，

甘氨酸 5-35mg/L，

组氨酸 20-70mg/L，

异亮氨酸 30-80mg/L，

亮氨酸 35-85mg/L，

赖氨酸 50-180mg/L，

甲硫氨酸 15-40mg/L，

苯丙氨酸 30-50mg/L，

脯氨酸 5-40mg/L，

丝氨酸 10-40mg/L，

苏氨酸 20-80mg/L，

色氨酸 10-30mg/L，

酪氨酸 30-80mg/L，和

缬氨酸 30-80mg/L，按培养基的总体积计；

所述的活性添加剂为转铁蛋白、白蛋白和胰岛素，其中，所述白蛋白的含量为20-200mg/L，所述转铁蛋白的含量为10-40mg/L，所述胰岛素的含量为10-60mg/L，按培养基的总体积计；

所述维生素为：生物素 0.005-0.15mg/L，叶酸 4-10mg/L，烟酰胺 4-15mg/L，吡哆醇2-7mg/L，硫胺素 2-7mg/L和硫辛酸 0.4-1.0mg/L；

所述盐类为：氯化镁 30-110mg/L，硫酸镁 30-110mg/L，氯化钙 150-200mg/L，氯化钾300-500mg/L，氯化钠 2000-7000mg/L，磷酸氢二钠 50-150mg/L，磷酸二氢钠 50-150mg/L和丙酮酸钠 100-200mg/L；

所述脂类为：胆固醇 2-7mg/L，生育酚醋酸酯 0.004-0.1mg/L，豆蔻酸 0.004-0.1mg/L，棕榈酸 0.004-0.1mg/L，棕榈油酸 0.004-0.1mg/L，硬脂酸 0.004-0.1mg/L，吐温80 1-3.1mg/L，嵌段式聚醚F68 0.3-1000mg/L；

所述的微量元素为：硫酸铜 10-50mg/L，硝酸铁 30-200mg/L，硫酸亚铁 0.3-0.7mg/L，亚硒酸钠 50-150mg/L；

所述核酸类物质为：次黄嘌呤 2-10 mg/L，胸苷 0.1-0.7mg/L；

所述蛋白水解物为胰蛋白水解物，2000-4000 mg/L；葡萄糖含量为1000-7000 mg/L。

2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述精氨酸的浓度为120-180 mg/L，按培养基的总体积计。

3. 如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述精氨酸的浓度为140-160 mg/L，按培养基的总体积计。

4.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的活性添加剂中，转铁蛋白、白蛋白和胰岛素的质量比为：1-10：2-40：1-10。

5. 如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的葡萄糖的含量为2000-5000 mg/L。

6.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的培养基还含有选自下组的成分：缓冲剂、酸碱指示剂、或其组合。

7.一种培养乳仓鼠肾细胞BHK21的方法，包括步骤：在权利要求1所述的培养基中接种乳仓鼠肾细胞，然后在适合生长的条件下培养BHK21细胞一段时间。

8.一种如权利要求1所述的培养基用途，其特征在于，(a)用作培养乳仓鼠肾细胞BHK21；(b)用于基于BHK21细胞培养的口蹄疫疫苗的生产。