[发明专利]一种黄花补血草的组织培养方法

权利要求书

1.一种黄花补血草的组织培养方法，通过愈伤组织诱导途径获取再生苗，其特征在于包括如下步骤：

(1)种子消毒：将黄花补血草种子用流水冲洗15min，然后用75％酒精消毒10min；再用0.1％HgCl₂对种子深度灭菌10min，最后用无菌水冲洗；

(2)无菌苗培养：将消过毒的黄花补血草种子接种于MS固体培养基表面，置于25℃、光照条件下培养；

(3)愈伤组织诱导：以黄花补血草无菌苗的子叶为外植体，接种于愈伤组织诱导培养基，置于25℃、黑暗条件下培养，获得愈伤组织；

所述愈伤组织诱导采用的培养基为MS+6-BA 1mg·L^-1+2-4D 1mg·L^-1，该培养基含30g·L^-1蔗糖，8g·L^-1琼脂，pH为5.8；

(4)不定芽分化：将诱导出的愈伤组织切成小块，转接于不定芽分化培养基，置于25℃、光照条件下培养，在愈伤组织表面即可分化出不定芽；

所述不定芽分化培养基为MS+6-BA 1mg·L^-1+IBA 6mg·L^-1，该培养基含30g·L^-1蔗糖，8g·L^-1琼脂，pH为5.8；

(5)生根培养：将愈伤组织分化出的不定芽剪下，接种于生根培养基，置于25℃、光照条件下培养；

生根培养基为MS+IBA 3mg·L^-1，该培养基含30g·L^-1蔗糖，8g·L^-1琼脂，pH为5.8。

2.根据权利要求1所述的一种黄花补血草的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中，用无菌水冲洗5次，每次5min，经无菌水冲洗后，在无菌条件下，用无菌滤纸吸干种子表面水分。

3.根据权利要求1所述的一种黄花补血草的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(2)中，将消过毒的黄花补血草种子在光照条件下培养25天。