[发明专利]一种肺癌血清标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种肺癌血清标志物及其应用。

背景技术

肿瘤标记物是肿瘤细胞产生和释放的某种物质，常以抗原、酶、激素等代谢产物的形式存在于肿瘤细胞内或宿主体液中，根据其生化或免疫特性可以识别或诊断肿瘤。肿瘤标记物在临床上主要用于对原发肿瘤的发现、肿瘤高危人群的筛选、良性和恶性肿瘤的鉴别诊断、肿瘤发展程度的判断、肿瘤治疗效果的观察和评价以及肿瘤复发和预后的预测等。可通过生物化学反应、放免法、酶免法、电化学发光等方法检测。

异柠檬酸脱氢酶2(isocitrate dehydrogenase 2,IDH2)是细胞代谢途径中参与三羧酸循环的酶，位于染色体15q26.1，亚细胞定位于线粒体基质。其生理功能是正向催化异柠檬酸氧化产生α-酮戊二酸，同时还原NADP+产生NADPH。IDH2的逆向反应催化α-酮戊二酸产生异柠檬酸，并消耗NADPH产生NADP+。

近期的研究已报道IDH2突变产生致癌代谢物2-羟基戊二酸，能抑制胶质瘤分化和促进肿瘤形成。IDH2基因敲除小鼠体内的移植瘤形成受到明显抑制，肿瘤血管生成标志物明显减少。其同源蛋白IDH3a诱导HIF1α途径的代谢重编程及血管生成促进肿瘤生长。IDH1/2逆向反应时，消耗NADPH，但是其产物苹果酸可转运至胞浆经苹果酸酶产生NADPH，降低细胞的ROS水平，维持细胞氧化还原状态平衡，促进细胞存活。IDH2也可以在低氧条件通过谷氨酰胺代谢经过a-酮戊二酸产生柠檬酸，从而促进细胞增殖和增加细胞活力。

发明内容

本发明的发明人通过临床大样本数据库的查询，发现IDH2的高表达降低肺癌病人的总生存期和无进展生存期，提示IDH2可能参与肺癌的发生及疾病发展过程。进一步使用酶联免疫吸附分析(ELISA)方法对肺癌Ⅰ期患者的及健康人群血清IDH2含量进行了分析，并比较肺癌切除手术后与手术前患者血清IDH2的含量。发现IDH2在肺癌患者血清中的含量明显增高，且肺癌切除手术后相对手术前的血清IDH2含量降低。因此，血清中的IDH2含量可以用于肺癌的筛查与诊断、手术治疗效果的候选标志物。即，本发明提供了一种肺癌血清标志物，该标志物为IDH2。该标志物可用于制备诊断肺癌的药物、治疗肺癌的药物、诊断肺癌的试剂盒以及肺癌诊断芯片。

总之，IDH2在肺癌Ⅰ期病人的血清中含量增加，可以对被检者是否患有肺癌进行初步确定。该肿瘤标志物在肺癌Ⅰ期病人手术后血清含量降低，可以作为肺癌病人手术治疗的候选标志物。

附图说明

图1为实施例1实验结果图：图1a和1b显示了IDH2表达对应的肺癌病人的总生存期和无进展生存期；

图2为实施例2实验结果图：图2a显示了IDH2在肺癌患者确诊后手术治疗前与健康人群血清中IDH2的蛋白含量，图2b显示了肺腺癌、肺鳞癌与健康人群血清中IDH2的蛋白含量，图2c显示了肺癌患者手术切除瘤体前与切除后血清中IDH2的蛋白含量。

具体实施方式

实施例1.IDH2表达高低与肺癌病人总生存期和无进展生存期具有关联性

目前已有包含大量肺癌样本基因表达及其临床信息，如生存期与无进展生存期等的数据库，提供公开的数据供研究者分析。为研究IDH2与肺癌病人的总生存时间与疾病治疗至初次进展时间的关系，申请人调取临床样本数据库中IDH2表达及肺癌病人的总生存期与无进展生存期的数据，进行分析统计。

实验方法：

通过查询kmplot数据库(包含1928例肺癌样本)中IDH2表达与生存期数据。采用cox函数分析生存期数据，绘制IDH2表达与Kaplan-Meier生存期曲线，并进行统计学分析。

实验结果：

如图1a所示，IDH2高表达降低肺癌病人的总生存期，风险值为1.27(95％CI＝1.12-1.45)，结果具有统计学差异(P＝0.00023)。如图1b所示，IDH2高表达降低肺癌病人的无进展生存期，风险值为1.37(95％CI＝1.13-1.66)，结果具有统计学差异(P＝0.0014)。

实施例2.IDH2在肺癌患者与健康人群血清，肺癌患者术后和术前血清有显著差异。

本部分研究对72例健康人及28例肺癌Ⅰ期患者样本外周血血清IDH2含量进行检测，其中28例肺癌包括20例腺癌和8例鳞癌样本。28例肺癌患者均采用手术切除肺癌组织的治疗方式，并在手术治疗前和治疗后约7天采集外周血血清，冻存于-80度。健康人群外周血样本冻存于-80度。

实验方法：