[发明专利]一种马钱子苷元生物样品的测定方法

权利要求书

1.一种马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)生物样品处理：生物样品采集后，立即与0.3％的甲酸生理盐水混合，离心，取混合离心后的上层澄清液体作为待测液，在待测液中加入内标、甲醇，涡旋后离心，取上清液进行LC-MS/MS分析，所述的内标为环黄芪醇；

(2)采用超高效液相色谱法-电喷雾离子化串联质谱(LC-MS/MS)法检测马钱子苷元在生物样品中的浓度，LC-MS/MS法中液相系统条件为流动相：A相为0.1％甲酸水，B相为甲醇，梯度洗脱；0-1min 20％B，1-2min20％～95％B，2-3min 95％B，3-3.5min95％～20％B；色谱柱为Thermo Hypersil GOLD 50*2.1；流速：0.2mL/min；柱温：30℃；样品盘温度：20℃；进样量：3μL；质谱系统条件为：离子源：H-ESI；喷射电压：3500V；鞘气：30Arb；辅助气：8Arb；尾吹气：0Arb；离子传输毛细管温度：325℃；气化温度：50℃。

2.如权利要求1所述的马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，生物样品处理中的生物样品包括血液、尿液、胆汁、脏器、粪便。

3.如权利要求2所述的马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，血液、尿液、胆汁采集后与等体积0.3％甲酸生理盐水混合，离心后取上层澄清液体作为待测液；脏器、粪便取样后立即用0.3％甲酸生理盐水研磨，离心后取上层澄清液体作为待测液。

4.如权利要求1所述的马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，生物样品处理时取50μL待测液，加入10μL内标工作液和140μL甲醇沉淀液，涡旋混匀，10000r/min离心10min，取上清液，进样3μL进行LC-MS/MS分析。

5.如权利要求4所述的马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，所述的内标工作液为1.0μg/mL的环黄芪醇甲醇溶液。

6.如权利要求1所述的马钱子苷元生物样品的测定方法，其特征在于，马钱子苷元的m/z母离子→子离子为229.1→179.104，碰撞能为11v，RF lens为109v；内标环黄芪醇的m/z母离子→子离子为491.4→143.2，碰撞能为9v，RF lens为105v。