[发明专利]一种保存泪液的方法

说明书

技术领域

本发明涉及实验样本保存技术领域，具体涉及一种保存泪液的方法。

背景技术

泪液覆盖在眼表上皮细胞之上，对于眼起到润滑、保护、营养及完善视觉等重要作用。泪液是一种成分复杂的细胞外液，含有蛋白质、脂质、核酸、小分子代谢物、以及电解质等等。de Souza等人^[1]，在人泪液中鉴定到491个蛋白质。2012年Lei Zhou等人^[2]，通过应用基于色谱分离的深度二维鉴定技术，鉴定到1543个泪液蛋白质。泪液中的脂质由眼睑上的油脂腺体分泌产生，已鉴定出150种脂质^[3]。目前，在人泪液中鉴定出100种小分子代谢物^[4]。

泪液作为一种重要的体液获取无创，其改变能够反应眼部及全身的健康和疾病状况，是寻找疾病标志物的一种重要来源，干眼症^[5,6]、结膜松弛症^[7]、眼睑炎^[8]、干燥综合征^[9]、自身免疫性眼病^[10]等。

20世纪90年代后期，生物样本库(Biobank)的概念被提出，即标准化收集、处理、储存和应用健康和疾病生物体的生物大分子、细胞、组织和器官等样本，包括人体器官组织、全血、血浆、血清、生物体液或经处理过的生物样本，并用于疾病的临床治疗和生命科学研究的生物应用系统。随着精准医学概念的提出，生物样本库在疾病诊断、治疗的研究中起到越来越重要的角色。泪液作为重要的生物样本，如果能将其与临床病历在疾病的每个阶段一同保存下来，那么在未来寻找生物标志物的回顾性和前瞻性研究中，特别是在大规模临床验证实验中，将起到不可估量的作用。

目前，泪液的保存主要是用滤纸条浸润收集后置于离心管内-80℃冻存，并且在样本采集地至检测地运输过程中，需要在-80℃全程冷链。此方法占用存储空间大、超低温保存高能耗、样品远距离运输对温控 要求高。目前的方法不易于样本的运输保存，并且运输过程中如果温控不合标准容易导致泪液中生物成分的降解。因此，开发出一种简单廉价、并方便运输的保存泪液的方法，能使大规模全面保存泪液样本更加经济可行。

发明内容

本发明的目的在于提供一种保存泪液的方法，该方法简单易操作、占用存储空间小、可室温保存、泪液中生物成分不易降解丢失，尤其是泪液中的蛋白质不易降解丢失。基于上述目的，本发明提供的一种保存泪液的方法，包括以下步骤：

1)利用滤纸条浸润收集泪液；

2)对步骤1)中浸润有泪液的滤纸条进行干燥处理；

3)将步骤2)中干燥后的滤纸条置于密封容器中，抽真空后保存。

作为一个优选的实施方案，所述滤纸条是用于施墨试验的泪液检测滤纸条。其中，所述施墨试验是指用于检测泪腺分泌功能的试验。

进一步地，所述泪液检测滤纸条的大小为4-6mm×35-40mm。

进一步地，在步骤1)中将所述滤纸条置于下眼睑内非局部麻醉，闭眼3-5min后取出滤纸条，从而浸润收集泪液。

作为一个优选的实施方案，在步骤2)中，所述干燥处理通过干燥器进行，或者使用电吹风、吹干机或风干机吹干进行。

进一步地，在步骤2)中，所述干燥处理的时间为1min-3min，温度为25℃-60℃。

作为一个优选的实施方案，在步骤3)中所述密封容器是封装袋。

作为一个优选的实施方案，在步骤3)中所述保存的温度为室温。

作为一个优选的实施方案，所述泪液中含有蛋白质、脂质、核酸、小分子代谢物、和电解质。

进一步地，所述泪液中含有蛋白质。

从以上所述可以看出，本发明提供的保存泪液的方法与传统的直接冻存泪液样本的方法相比，保存效果没有明显差异。而且该干燥保存方法简单易操作、占用存储空间小；最重要的是泪液中生物成分在干燥、真空状态下可进行一定时间的室温保存，而不会发生降解丢失。 因此，该方法有利于泪液样本的远距离采集和运输，从而使得低成本、大批量、广泛收集泪液标本成为可能。

附图说明

图1：SDS-PAGE分析结果，其中“C”代表采用传统方法直接冻存吸收有泪液的滤纸条；“E”代表采用本发明的保存泪液的方法保存滤纸条，其中“1”、“2”、“3”分别代表：1号受试者、2号受试者和3号受试者的泪液样本。