[发明专利]一种利用超高效合相色谱串接QDa同时快速检测白酒中7种生物胺的方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测技术领域，具体地说是一种利用超高效合相色谱串接QDa检测器同时快速检测白酒中7种生物胺的方法，属于酒类分析技术领域。

背景技术

生物胺是生物活性物质，主要包括β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺、亚精胺等，其存在于多种食品尤其是发酵食品(如奶酪、葡萄酒、啤酒、米酒、发酵香肠、调味品)、水产品及肉类产品等中。生物胺尤其是组胺，它们本身就有毒性，因此其是衡量肉类食品和水产品是否新鲜、酒的生产过程中卫生条件好坏的一个主要指标。

目前的GB标准采用比色法或者液相色谱-衍生化法检测。其中，比色法只能半定量，液相色谱-衍生法不稳定，操作费时、麻烦，且衍生化试剂苯甲酰氯有毒，不利于人体健康。有文献报道采用串联四极杆法测试生物胺，但是由于生物胺分子量小，没有丰度高的碎片，且碎片太小，检测结果容易受到干扰。

此外，酒中的生物胺限量值低，使用原有的高效液相衍生法满足不了出口的低限量测试要求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用超高效合相色谱仪串接QDa检测器同时快速检测白酒中7种生物胺(组胺、腐胺、尸胺、苯乙胺、亚精胺、酪胺以及章鱼胺)的方法。本发明可以为白酒中生物胺检测的准确判定、快速检测提供科学依据。

本发明解决技术问题，采用如下技术方案：

本发明利用超高效合相色谱串接QDa同时快速检测白酒中7种生物胺的方法，其特点在于：

所述的7种生物胺为组胺、腐胺、尸胺、苯乙胺、亚精胺、酪胺以及章鱼胺；

所用仪器为：配有QDa检测器的超高效合相色谱仪、色谱柱为BEH C18色谱柱(3.0×100mm,1.7μm)；涡旋仪及移液枪；

所述方法包括如下步骤：

(1)对待测白酒酒样进行前处理：

准确量取1.0～5.0mL待测白酒酒样于10mL塑料离心管中，加入8～10mL体积浓度为80％的乙腈溶液，涡旋1～5min，1000转/分钟离心5～10min，0.22μm滤膜针头过滤器过滤，获得待测样品；待进样；

(2)条件设定

设定超高效合相色谱仪的条件为：

色谱柱为BEH C₁₈色谱柱(3.0×100mm,1.7μm)；柱温为30～50℃；

样品室温度为10～20℃

流动相：A相为二氧化碳，B相为异丙醇；流速为2～3mL/min；洗脱方式为梯度洗脱；进样量为1～3μL；检测所用时间为7～10min；ABPR压力为1885～2200psi；梯度洗脱的具体程序为：0min时，流动相B异丙醇的体积分数为5～10％；由0min到4.0min，异丙醇的体积分数从5～10％升至80～90％，并保持0.5min；由4.5min到6.5min，异丙醇的体积分数从80～90％降至5～10％；由6.5min到8.0min，异丙醇的体积分数保持5～10％。

设定QDa检测器的条件为：

系统：ACQUITY QDa质谱检测器，Performance模式；

离子化方式：ESI+；

监测方式：选择离子监测(SIR)；

喷雾电压：1.3kV；

离子源温度：550～600℃；

选择离子监测方式的各生物胺的质谱参数表如表1所示。

表1：选择离子监测方式的质谱参数表