[发明专利]一种科学有效的川附子繁殖方法

权利要求书

1.一种科学有效的川附子繁殖方法，其特征在于：

第一步：外植体的选择与消毒三月份选取一年生健壮川附子植株的茎尖、叶片、根、茎段、带腋芽的茎段、叶柄、或者上一年收取的种子为外植体，低温4℃处理3天；用自来水冲洗干净，用70～75％酒精处理15～20s，0.1％升汞液浸泡10～12min，倒去升汞液，用无菌水换洗4～5次；将茎尖剥离后切成0.2mm长，根、茎段、带腋芽的茎段及叶柄切成1.3～1.7cm，叶片切成1cm×1cm大小，待用；

第二步：接种、诱导愈伤组织以MS为基本培养基，在基本培养基中附加NAA0.1～0.2mg/L+6-BA1.0～4.0mg/L作为诱导愈伤组织的培养基，将上述第一步处理好的外植体按常规方法接种进行愈伤组织诱导，黑暗培养28～32天，得到愈伤组织；

第三步：诱导丛生芽在MS基本培养基中附加NAA0.1～0.2mg/L+6-BA 2.0～2.5mg/L作为分化培养基诱导丛生芽，将上述第二步获得的愈伤组织转接到该分化培养基上，进行丛生芽诱导，光照培养28～32天，诱导出丛生芽；

第四步：诱导生根在MS基本培养基中附加IBA1.0mg/L+AC3.0g/L-1；适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为：MS+NAA0.2mgL+-1PVP3.0g/L作为生根培养基，将上述第三步长至3～5cm左右的丛生芽转接到该生根培养基上诱导根的形成，培养时间为20～25天，得到生根的试管苗；

第五步：炼苗移栽待上述第四步的试管苗在生根培养基上培养至根长4～5cm、植株6～7cm，选择健壮幼苗打开瓶盖进行炼苗，室温炼苗2～3天后，用自来水洗净苗上的培养基，移栽至用0.1％多菌灵处理过的腐质土和珍珠岩混合基质中，置于温度22±1℃，光照周期12h/d，光照强度1500～2000lx的生长室内，薄膜覆盖，保持环境湿润一周后去掉薄膜转入大田栽培。

2.根据权利要求1所述的科学有效的川附子繁殖方法，其特征在于：所述的第一步中的外植体选自一年生健壮无病害的川附子植株的茎尖、叶片、茎段、带腋芽的茎段，经低温4℃处理3天后用于消毒、接种、诱导。

3.根据权利要求1所述的科学有效的川附子繁殖方法，其特征在于：所述的MS基本培养基是指经过改良的MS培养基，其中KH2PO4的用量200mg/L。

4.根据权利要求1所述的科学有效的川附子繁殖方法，其特征在于：所述的第五步中的腐质土和珍珠岩混合基质，为腐质土与珍珠岩以体积比为2∶1的混合基质。