[发明专利]一种高芽孢率的地衣芽孢杆菌发酵方法

权利要求书

1.一种提高地衣芽孢杆菌的芽孢率的发酵方法，其特征在于，分为下述两个阶段：在pH7.0-7.5的培养基中接种地衣芽孢杆菌，于36-38℃发酵培养至20-26h；然后调节并控制发酵液至pH8.0-8.5，于36-38℃继续发酵培养，至从接种时起30-36h时停止发酵，收获菌体，发酵液的pH通过流加pH调节剂的方式进行控制，所用pH调节剂选自无机酸、无机碱，所述培养基为营养肉汤培养基，所述地衣芽孢杆菌是保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心、保藏编号为CGMCC NO.0183的菌株。

2.如权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)种子活化培养：将地衣芽孢杆菌菌种接种于pH7.0-7.5的种子活化培养基中，于36-38℃摇床培养4-10h，得种子活化培养液；

b)种子培养：将步骤a)得到的种子活化培养液以体积分数1-10％的接种量接种于pH7.0-7.5的种子培养基中，于36-38℃培养4-10h，得种子培养液；

c)发酵培养：将步骤b)得到的种子培养液以体积分数10-30％的接种量接种到pH7.0-7.5的发酵培养基中，于36-38℃培养20-26h；

d)后期发酵培养：调节并控制发酵液至pH8.0-8.5，于36-38℃继续发酵培养，至从接种时起30-36h时停止发酵，收获菌体。

3.如权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，步骤a)中所述种子活化培养基为营养肉汤培养基，组成如下：蛋白胨10g/L，牛肉浸粉3g/L，氯化钠5g/L。

4.如权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，步骤b)中所述种子培养基为营养肉汤培养基，组成如下：蛋白胨10g/L，牛肉浸粉3g/L，氯化钠5g/L。

5.如权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，步骤c)中所述发酵培养基是营养肉汤培养基，组成如下：蛋白胨10g/L，牛肉浸粉3g/L，氯化钠5g/L。

6.如权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，在步骤c)和d)的发酵培养中，溶氧保持在20-50％。

7.如权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，在步骤d)的发酵培养中，pH调节剂选自磷酸、盐酸、氨水。