[发明专利]基于蛋白标志物HSP90AB1诊断肺癌患者的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白标志物HSP90AB1在诊断早期肺癌患者中的应用，以及制备相应的检测试剂盒中的应用。

背景技术

原发性肺癌是中国最常见的癌症。肺癌出现症状时多属中晚期，切除后复发、转移率高。因此，肺癌的诊断对延长患者的生存时间和降低死亡率具有重要意义。

现代医学科学的进步和先进的医疗手段对于早期阶段的肺癌，特别是原发性肺癌的治疗具有显著的疗效。因此，现代医学已经把重点聚焦于肺癌的早期发现，使肿瘤在发展到晚期之前、得到有效的治疗。肺癌早期检测和发现就是要在肿瘤扩散和转移之前、或在肿瘤发展到不可治疗之前发现。在肿瘤还处在原位或可治愈阶段发现，这样不但可以降低死亡率，而且还可以降低肺癌发病率和因治疗而带来的巨大经济和社会负担。肺癌的诊断和发现研究主要包括以下阶段：1、潜在肺癌标志物如基因、蛋白或抗原的发现或肿瘤影像工具的发明；2、将发现的肺癌标志物转化为甄别肺癌的筛选工具，应用于临床；3、对所建立的肺癌诊断方法及其应用的评估。

肺癌早期标志物是指在早期肺癌的发生过程中，由肺癌细胞本身所产生的、或者由机体应对肺癌细胞而产生的特异性分子。这些分子可以反映肺癌的存在和进展，往往特异性出现在肺癌患者，而在正常人不存在、或其表达水平与肺癌患者相比有显著差异。这些分子通常属于蛋白质、多肽、核酸或小分子化合物，主要包括癌基因及其产物、激素、酶(同工酶)、肺癌特异或相关抗原以及相应针对这些抗原的自身抗体、多胺等。

1978年Herberman在美国NCI召开的人类免疫及肺癌免疫诊断会上首次提出肺癌标志物的概念以后，肺癌标志物广泛应用于临床。目前发现的具有临床意义的肺癌标志物已达100多种。理想的肺癌标志物应有以下特征：(1)灵敏度高；(2)特异性好；(3)能对肺癌进行定位；(4)与病情严重程度、肺癌大小或分期有关；(5)能监测对肺癌治疗的效果；(6)监测肺癌的复发；(7)预测肺癌的预后。由于肺癌病因的复杂性，故发现“理想”的早期肺癌标志物就十分困难。至今为止，尚无一种“理想”的肺癌诊断标志物。

Hsp90是ATP依赖的蛋白质，其可利用ATP水解产生的能量参与蛋白质的正确折叠，稳定蛋白质结构，参与细胞信号转导激素应答及转录调控等反应以及肿瘤凋亡、增殖相关通路的调节[1-2]。Hsp90对于因环境改变等各种应激状态下蛋白质稳定性的保持至关重要[3]。除了在正常细胞中发挥重要作用外，Hsp90与底物蛋白相结合参与多种疾病的发生发展。目前认为，人类Hsp90主要包括4种亚型：Hsp90AA1(Hsp90α)和HSP90AB1(Hsp90β)均位于胞质内，Grp94亚型位于内质网中，而TRAP1亚型则定位于于线粒体基质内。其中Hsp90α和Hsp90β是主要的Hsp90亚型，它们以二聚体的形式存在于细胞质中。Hsp90α和Hsp90β有85％同源，但是两者作用不同，Hsp90α是诱导性表达，参与应激状态下细胞保护和细胞周期的调节，而Hsp90β是组成性表达，参与早期胚胎发育、生殖细胞成熟、细胞骨架稳定、细胞转化、信号转导及细胞长期适应性[4]。

目前，有关Hsp90在肺癌中的研究报道较少。Ramalingam S等人对Hsp90新型抑制剂ganetespib的一项临床II期研究发现，在治疗晚期肺腺癌患者过程中，ganetespib与多西他赛(docetaxel)联合用药治疗与多西他赛单药治疗相比，可延长晚期肺腺癌患者的总生存期[5]。罗永章等的研究表明，Hsp90α是一种全新的肿瘤标志物。

发明内容

本发明第一方面涉及检测HSP90AB1蛋白的分子在制备用于诊断早期癌症，尤其是早期肺癌癌症患者的试剂盒或检测试剂中的用途。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述检测HSP90AB1蛋白的分子是指能够特异性检测HSP90AB1蛋白表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述蛋白质为抗体，其能够与HSP90AB1蛋白特异性结合，优选为单克隆抗体。

在本发明的具体实施方案中，采用免疫化学的方法检测HSP90AB1蛋白。

根据本发明第一方面任一项的用途，所述试剂盒或检测试剂用于血浆样品的检测。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述诊断的判断方法为，血浆中HSP90AB1的含量高于63.68ng/ml，则待检者为候选的早期肺癌患者。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述检测HSP90AB1蛋白的分子还带有可检测的标记。