[发明专利]子囊霉素的纯化方法

权利要求书

1.一种子囊霉素的纯化方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

1)将含有子囊霉素的链霉菌发酵液进行固液分离过滤，得到菌丝体；

2)菌丝体用酒精浸泡提取，得到浸提液，减压浓缩浸提液至无酒精为止，得到浓缩后的浸提液，用乙酸丁酯或乙酸异丁酯萃取浓缩后的浸提液，取上相萃取液，浓缩上相萃取液至上相萃取液体积的1/3-1/4体积，得到浓缩液；

3)先后分别用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤步骤2)中浓缩液，用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤过程中都取上相液，浓缩上相液中的乙酸丁酯或乙酸异丁酯至干，得到稠状浓缩物；

4)用甲醇或者乙醇溶液溶解步骤3)中的稠状浓缩物，过滤后得滤液；

5)用非极性烷烃溶剂萃取步骤4)中的滤液，取下相萃取液，浓缩下相萃取液中甲醇或者乙醇至干，得到浓缩物；

6)用甲基叔丁基醚溶解步骤5)中的浓缩物，得到溶液，用正己烷与该溶液混合静置结晶，得到结晶混合物；

7)过滤步骤6)中的结晶混合物，滤去母液，得到结晶物；

8)用甲基叔丁基醚浸润抽滤洗涤步骤7)中结晶物，烘干，即得到含有子囊霉素的结晶固体；

所述的步骤4)用甲醇或者乙醇溶液溶解步骤3)中的稠状浓缩物后过滤前，还包括用活性炭进行脱色处理，活性炭与步骤3)中稠状浓缩物的重量比为2:100。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤2)中浓缩后的浸提液与每次萃取用的乙酸丁酯或乙酸异丁酯的体积比为1:1；用乙酸丁酯或乙酸异丁酯萃取浓缩后的浸提液2次，每次萃取都取上相萃取液，合并第一次和第二次的上相萃取液并浓缩至合并后上相萃取液总体积的1/3-1/4体积，得到浓缩液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤3)中洗涤用的饱和碳酸氢钠与步骤2)中浓缩液的体积比为1:1，洗涤1次；每次洗涤用的饱和食盐水与步骤2)中浓缩液的体积比为0.5:1，洗涤2次。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤4)中溶解用的甲醇或者乙醇与步骤3)中稠状浓缩物的重量比为2:1至5:1。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤5)中每次萃取用的非极性烷烃溶剂与步骤4)中的滤液的体积比为1:1，萃取次数为2～3次，合并下相萃取液。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤5)中非极性烷烃溶剂为正己烷、正庚烷或石油醚。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤6)甲基叔丁基醚与步骤5)中的浓缩物重量比为1:0.6至2:1，正己烷与溶液的体积比为0.2:1。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤6)结晶温度为0℃至5℃，结晶时间为40小时至45小时。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤8)洗涤次数为2～3次，烘干温度为45至50℃，烘干时间为3至5小时。