[发明专利]人PDCD1基因sgRNA的用途及其相关药物

权利要求书

1.一种分离的核酸分子，所述核酸分子包含：单链RNA，所述单链RNA中含有能够在严紧条件下与PDCD1基因杂交的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述PDCD1基因来源于人。

3.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述单链RNA的序列与PDCD1基因中的靶序列基本相同。

4.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述PDCD1基因中的靶序列选自如SEQ ID NO：1～131所示之任一序列或如SEQ ID NO：1～131所示之任一序列经过取代、缺失或添加一个或几个碱基序列且具有与如SEQ ID NO：1～131所示之任一序列相同活性的序列。

5.根据权利要求1～3任一权利要求所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述单链RNA为小向导RNA。

6.根据权利要求5所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述小向导RNA的序列如SEQ ID NO：399～529任一序列所示。

7.一种PDCD1基因干扰核酸构建体，含有编码如权利要求1～6任一权利要求所述分离的核酸分子中的基因片段，能表达所述核苷酸分子。

8.如权利要求7所述PDCD1基因干扰核酸构建体，其特征在于，所述PDCD1基因干扰核酸构建体选自病毒载体或质粒载体。

9.如权利要求8所述PDCD1基因干扰核酸构建体，其特征在于，所述PDCD1基因干扰核酸构建体选自慢病毒载体、腺病毒载体、逆转录病毒载体、AAV。

10.如权利要求9所述PDCD1基因干扰核酸构建体，其特征在于，所述慢病毒载体选自：

pLKO.1-puro、pLKO.1-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-tGFP、pLKO.1-CMV-Neo、

pLKO.1-Neo、pLKO.1-Neo-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-TagCFP、

pLKO.1-puro-CMV-TagYFP、pLKO.1-puro-CMV-TagRFP、pLKO.1-puro-CMV-TagFP635、

pLKO.1-puro-UbC-TurboGFP、pLKO.1-puro-UbC-TagFP635、pLKO-puro-IPTG-1xLacO、

pLKO-puro-IPTG-3xLacO、pLP1、pLP2、pLP/VSV-G、pENTR/U6、

pLenti6/BLOCK-iT-DEST、pLenti6-GW/U6-laminshrna、pcDNA1.2/V5-GW/lacZ、

pLenti6.2/N-Lumio/V5-DEST、pGCSIL-GFP或pLenti6.2/N-Lumio/V5-GW/lacZ中的任一。

11.一种PDCD1基因干扰慢病毒，由权利要求7～10任一权利要求所述干扰核酸构建体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装而成。

12.如权利要求1～6任一权利要求所述的分离的核酸分子，权利要求7～10任一权利要求所述PDCD1基因干扰核酸构建体，和/或权利要求11所述的PDCD1基因干扰慢病毒在制备T细胞活性促进剂中的用途。

13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述T细胞活性的促进剂用于作用于T细胞，降低T细胞中PDCD1基因的表达，获得具有较高的杀伤力的高活性T细胞，所述高活性T细胞可通过CART，DC，CIK或DC-CIK免疫治疗手段制备肿瘤或自身免疫疾病治疗药物。

14.一种T细胞活性促进剂，其有效物质含有如权利要求1-6任一权利要求所述的分离的核酸分子，和/或权利要求7-10任一权利要求所述PDCD1基因干扰核酸构建体，和/或权利要求11所述的PDCD1基因干扰慢病毒，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

15.一种提高T细胞活性的试剂盒，所述试剂盒包括：存在于容器中的权利要求1-6任一权利要求所述的分离的核酸分子，和/或权利要求7-10任一权利要求所述PDCD1基因干扰核酸构建体，和/或权利要求11所述的PDCD1基因干扰慢病毒。